《表2 不同转染试剂和不同剂量GFP质粒转染PGCs后48 h的阳性细胞数(个/孔)》

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《鸡原始生殖细胞转染条件优化》

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同一列不同字母表示差异显著（P<0.05）。

用3种不同转染试剂转染携带GFP蛋白的piggy Bac转座子质粒。结果表明，Lipofectamine 3000转染试剂中B3阳性细胞数最多，高于所有组别；其次是Lipofectamine 3000转染试剂B2，第三是Lipofectamine LTX&Plus Reagent转染试剂C3 （表2）。实验过程中还观察到Lipofectamine 2000转染试剂组以及其他两种试剂的高浓度组B4和C4对PGCs伤害较大，48 h后观察到大量PGCs死亡。在B3转染条件基础上，提高每孔中PGCs细胞数量到0.5×104，并减少转染时间至5 h，同时加入含有血清培养基，48 h后，在荧光显微镜下计数，发现阳性细胞数更多，每孔阳性细胞数超过了1000个。初步判断此条件下PGCs转染效率更佳（命名为D1），即质粒3μg、Lipofectamine 3000试剂4μL和PGCs细胞数0.5×104的配比。