《表2 引物序列：酿酒酵母异源合成己二酸》

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《酿酒酵母异源合成己二酸》

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注:下划线表示同源臂序列

Tfu己二酸逆降解途径共涉及5步反应，6个基因，分别为Tfu＿0875、Tfu＿2399、Tfu＿0067、Tfu＿1647、Tfu＿2576、Tfu＿2577。从上获取到基因序列，并在http://sg.idtdna.com/CodonOpt网站上进行密码子优化，送往苏州泓讯进行基因合成。基因合成在3个T载体上，得到载体p UCmT-0875-2399、pUCmT-0067-1647和p UCmT-2576-2577，通过引物0875-F/R、2399-F/R、0067-F/R、1647-F/R、2576-F/R、2577-F/R进行扩增后得到基因片段T-0875、T-2399、T-0067、T-1647、T-2576和T-2577，纯化后进行下一步实验。本研究中使用的引物序列见表2。