《表1 TEM-1、ROB-1及ftsI基因引物序列》

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（1）引物设计。依据文献[6-7]与GeneBank数据库设计β-内酰胺酶TEM-1、ROB-1基因及编码青霉素结合蛋白3的ftsI基因引物，引物由生工生物工程（上海）有限公司合成，并经过次黄嘌呤-氨基蝶呤-胸腺嘧啶脱氧核苷酸纯化。引物序列见表1。（2）PCR扩增体系。PCR反应体系总体积为50μL:10 mmol/L dNTP1μL，10×buffer 5μL，Mg+3μL，Taq DNA聚合酶0.5μL，10μmol/L上、下游引物各1μL，DNA模版5μL，无菌去离子水补足至50μL。扩增条件：94℃预变性7 min；94℃30 s，56℃（以TEM-1为例，其余基因引物退火温度见表1)30 s，72℃30 s循环30次；72℃延伸3 min。