《表1 实时定量PCR引物序列》

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《艾塞那肽对人牙周膜干细胞增殖、迁移和成骨分化的影响》

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将PDLSCs以2×105个细胞/孔的密度接种于6孔板，使用含10%胎牛血清的DMEM培养24 h。在成骨诱导培养液中分别加入0、5、10、20或50 nmol/L EX-4，成骨诱导7 d。采用TRIzol裂解细胞提取细胞总RNA，根据RNA浓度，使用反转录试剂盒进行反转录反应，得到cDNA。使用SYBRRPremix Ex试剂于LightCycler Roche 480 PCR仪进行实时定量PCR检测。甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）为管家基因，ALP、runt相关转录因子2(runt related transcription factor 2，Runx2）和骨钙素（osteocalcin，OCN）为目的基因，引物序列见表1。使用2-△△CT法分析检测结果，得到目的基因的相对表达量。