《表1 基因引物序列和片段长度》

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《喜树碱及其衍生物对肝肿瘤细胞SMMC-7721增殖的影响》

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收集对数生长期的细胞，制备细胞悬液，并进行细胞计数操作，调整细胞浓度至5×105个·m L-1，将混合均匀的细胞悬液接种于6孔板，实验重复3次。CPT，HCPT和CPT-11(10μg·m L-1，40μg·m L-1，80μg·m L-1）溶液处理SMMC-7721细胞24 h后，消化离心，收集各组细胞，用AxyPrep总RNA小量制备试剂盒提取细胞RNA。用1%琼脂糖凝胶电泳鉴定，利用核酸分析仪检测样品的浓度和纯度，将检测合格的RNA进行反转录。按照Prime ScriptTM RT reagent Kit with Gdan Eraser(Perfect Real Time）反转录试剂盒的操作步骤进行逆转录反应。c DNA的合成参照逆转录扩增试剂盒操作程序进行。PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳后通过凝胶成像系统分析结果。实验以GAPDH为内参基因，CAT和SOD1基因的表达水平按公式（2）计算，RT-PCR引物设计见表1。