《表1 SRAP标记引物组合及序列》
利用SRAP分子标记技术鉴定剑麻H.11648高产优选单株(优株)和普通H.11648(普通株)在DNA水平上的差异。采用CTAB方法分别提取优株及普通株叶片DNA,以普通株DNA检测引物重复性,记为CK1和CK2。试验使用正向引物2条(Me5、Me6)和4条反向引物(Em7、Em8、Em9和Em10)组成8引物组合进行扩增,引物序列和引物组合见表1。PCR反应体系如下:总反应体积为10μL,含(NH4)2SO4的1倍反应缓冲液,2 mmol/L MgCl2,d NTPs 2000μmol/L,Tag酶0.5 U,模板DNA 50 ng,正和反引物各50 ng,不足部分dd H2O补足。反应程序为:94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,共5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,共35个循环;72℃延伸5 min,4℃保存。经2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物[9]。
图表编号 | XD00156798600 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.05.30 |
作者 | 黄显雅、金刚、何如、覃旭、吴密、覃剑峰、彭欣怡、陈涛 |
绘制单位 | 广西壮族自治区亚热带作物研究所、广西壮族自治区亚热带作物研究所、广西农垦山圩农场有限公司、广西壮族自治区亚热带作物研究所、广西壮族自治区亚热带作物研究所、广西壮族自治区亚热带作物研究所、广西壮族自治区亚热带作物研究所、广西壮族自治区亚热带作物研究所 |
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