《表7 正交试验方差分析结果》

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《华山松SSR-PCR反应体系优化》


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**表示影响极显著(P<0.01)

由表7可知,引物用量对华山松SSR-PCR反应体系扩增效果的影响达极显著水平(P<0.01,下同),需要进行多重比较分析;TaqDNA聚合酶用量、DNA模板用量和dNTPs用量对华山松SSR-PCR反应体系的影响不显著(P>0.05,下同),无需进行多重比较分析。由表7还可知:FA>FD>FC>FB,即影响华山松SSR-PCR反应体系扩增效果的主次顺序为:引物用量>DNA模板用量>Taq DNA聚合酶用量>dNTPs用量,与极差分析结果略有差异。根据正交试验方差评分的估算边际均值(图4)可知,A因素4个水平的扩增效果排序为:A4>A3>A2>A1,即引物用量为0.35μL时扩增效果最好,与极差分析结果一致;B因素4个水平的扩增效果排序为:B2>B4>B3>B1,即dNTPs用量为1.80μL时扩增效果最好,与极差分析结果一致;C因素4个水平的扩增效果排序为:C1>C2>C4>C3,即Taq DNA聚合酶用量为1.10μL时扩增效果最佳,与极差分析结果存在差异;D因素4个水平的扩增效果排序为:D3>D2>D4>D1,即模板DNA用量为1.5μL时扩增效果最好,与极差分析结果存在差异。综上所述,最优水平组合为:A4D2C2B2,即引物用量0.35μL、DNA模板用量1.50μL、Taq DNA聚合酶用量1.10μL、d NTPs用量1.80μL。