《表3 本研究设计的简并引物》

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《紫花苜蓿Ⅲ型几丁质酶基因同源克隆与序列变异分析》


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从NCBI(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)(刘利娟等,2019)查找苜蓿、蒺藜苜蓿和其他豆科植物ChiⅢa基因的氨基酸和DNA序列,选择其中序列较为完整的27条序列,将其氨基酸序列对齐,在2个上游保守基序处和1个下游保守基序处设计多条简并引物。依据带型清晰与否、预期产物长度与实际产物长度是否接近这两条标准,通过多次的PCR反应,最终筛选出2条简并引物。这2条引物可用于分离苜蓿ChiⅢa基因的基因组序列(表3)。