《表2 LH氨基酸序列比对及系统发育进化树构建的参照物种信息》

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《大刺鳅促黄体生成素基因克隆及其组织表达分析》

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将获得的正向和反向序列在NCBI数据库中进行同源性比对，使用SeqMan Pro Version 7.1.0对中间片段序列、正向和反向序列进行剪切拼接（周惠强，2019），以获得大刺鳅LH基因全长cDNA序列。使用NCBI数据库中的BLAST对大刺鳅LH基因全长cDNA序列进行同源性比对，以DNAMAN 6.0推导其氨基酸序列；从GenBank中选择硬骨鱼类、两栖动物、鸟类和哺乳动物等物种的LH氨基酸序列（表2），应用ClustalX 2.1进行LH氨基酸序列比对，具体操作为：选择比对模型Multiple Alignment Mode（多序列比对），默认参数设置，选用Do Complete Alignment（进行完全比对），比对结果以BOXSHADE Server进行着色处理。采用Multiple Sequence Alignment by CLUSTALW进行物种同源性比对，并以MEGA 6.0中的邻接法（Neighbor-joining，NJ）构建系统发育进化树，选择模型为Poisson Correction（泊松修正），自引导检验（Bootstrap）设为1000。