《表1 LncRNA引物及小干扰RNA序列Tab 1 LncRNA primer and small interfering RNA sequences》

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《长链非编码RNA-8439促进肝癌细胞多能因子nanog的表达》

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LncRNA:Long non-coding RNA；qPCR:Real-time quantitative PCR；RCS:Reverse complementary sequence；GAPDH:Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase

用TRIzol试剂提取细胞及组织总RNA，根据c DNA反转录试剂盒操作说明进行反转录合成cDNA的第一链。以合成的cDNA为模板，扩增lncRNA-8439、lncRNA-1711、lncRNA-3440、lncRNA-4374、lncRNA-5958、lncRNA-6183、lncRNA-6779、lncRNA-7921、lncRNA-5834、nanog以及GAPDH基因（引物序列见表1）。PCR反应体系为20μL；反应条件:94℃预变性2 min，94℃变性15 s、60℃退火60 s、72℃延伸15 s，共45个循环。以lncRNA-8439及nanog扩增产物荧光强度分别与GAPDH扩增产物荧光强度的比值代表其相对表达情况。以水为模板扩增的反应结果作为PCR扩增的阴性对照。