《表1 Real-time PCR引物及lncRNA smart silencer序列》

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《LncRNA ADAMTS9-AS2表达上调抑制结直肠癌的增殖和转移》

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临床样本及细胞系中总RNA的提取按照TRIzo试剂说明书上的步骤进行。总RNA提取后，在分光光度计下测260 nm与280 nm处的光密度值（OD值），取OD260/OD280为1.8～2.0的RNA样品，按照说明书进行反转录合成cDNA。再按照Real-time PCR的操作步骤，使用ADAMTS9-AS2特异性引物对cDNA进行扩增，选取β-actin作为内参，每个样品设置3个复孔。RT-qPCR反应条件如下：95℃30 s；95℃变性15 s，60℃退火延伸60 s，40个循环。以2–ΔΔCt法计算ADAMTS9-AS2的相对表达量。引物序列见表1。