《表1 PAK2基因克隆引物列表》

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《瘤背石磺代谢蛋白PAK2基因的克隆、相对表达量及进化分析》

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依据NCBI网站Genbank寻找瘤背石磺近缘物种，如加州海兔、光滑双脐螺等的PAK2基因，将其与实验室瘤背石磺转录组数据库中的基因序列进行BLASTx对比验证，从而获得瘤背石磺PAK2基因序列。根据所获取的基因序列，利用Primer Premier 5.0软件设计引物，并进行验证以选出合适的PAK2引物（表1）进行下一步实验。用瘤背石磺c DNA作为模板，扩增目的基因片段以验证转录组数据库中PAK2片段序列的正确性。再设计3′RACE和5′RACE特异性扩增引物（表1），扩增目的片段。将扩增片段结果拼接得到PAK2基因序列，验证PAK2基因全长序列，多次重复测序用以消除错误的碱基。