《表1 牛牌19杂交种纯度鉴定特异引物》

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《牛牌19大白菜杂交种种子纯度快速鉴定方法研究》

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杂交种纯度鉴定引物从前期研究中筛选（刘栓桃等，2018），选择4对牛牌19杂交种特异的标记引物（表1），委托生工生物工程（上海）股份有限公司合成。PCR反应参照张志刚等（2016）含染料的2×Taq PCR Mastermix[天根生化科技（北京）有限公司，货号：KT201-01]进行，即20μL反应体系中包含2×Taq PCR Mastermix 10μL，10μmol·L-1的正、反向引物各1μL，DNA模板1μL，灭菌水7μL。PCR反应条件为：94℃预变性5 min；94℃变性30 s，59℃退火30 s，72℃延伸10 s，循环35次。PCR扩增在Bio Rad T 100梯度PCR仪上进行，扩增产物用6%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显色，数码相机拍照。