《表1 实验所用引物:Gac系统中gacS基因的缺失对东湖假单胞菌HYS毒性的影响》

《表1 实验所用引物:Gac系统中gacS基因的缺失对东湖假单胞菌HYS毒性的影响》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《Gac系统中gacS基因的缺失对东湖假单胞菌HYS毒性的影响》


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将大肠杆菌OP50、P.aeruginosa PAO1、P.donghuensis HYS和ΔgacS菌株在LB平板上划线,HYS/p BBR2、ΔgacS/pBBR2、ΔgacS/pBBR2-gacSHYS、ΔgacS/pBBR2-gacSpao1在含50μg·m L-1的卡那霉素抗性平板上划线。挑单菌落于5 m L液体LB培养基中,置于30℃、200 r·min-1摇床培养12 h,其中带有pBBR1-MCS2质粒的菌株均用50μg·m L-1的卡那霉素抗性平板培养。取200μL菌液滴加到NGM平板上,每个菌株滴5个NGM平板,待菌液晾干后,将滴有菌液的NGM平板放置于22℃恒温培养箱培养12 h。将同步培养到L4期的秀丽隐杆线虫转移到NGM-实验菌株平板上,每个平板20只。转移线虫的当天记为第1天,之后每5天记录1次线虫状态,同时将存活的线虫转移到新的NGM-实验菌株平板上,直至线虫全部死亡。通过统计线虫存活的个数和天数可指示菌株对线虫的毒性大小。本实验室培养秀丽隐杆线虫用大肠杆菌OP50作为食物维持,因此将仅含大肠杆菌OP50的处理组作为阴性对照。