《表1 小牛胸腺Polδ的分离纯化》

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《哺乳动物DNA聚合酶δ分离纯化研究进展》


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1980年由Lee等[13]从小牛胸腺中也分离得到了Polδ。Lee等将胎牛胸腺裂解上清同样通过硫酸铵分级沉淀结合多个层析柱,从1 kg胎牛胸腺中分离得到0.033 mg的Polδ,其比活性为28 000 U/mg。随后,Lee等又通过改进的方法对小牛胸腺中Polδ进行纯化(表1),该方法的关键步骤是在早期纯化过程中利用了苯基琼脂柱层析,去除了样品中大部分钙依赖性蛋白酶,最后酶的纯化倍数达到2280倍,比活性高达47 900 U/mg。通过凝胶电泳等实验,Lee等初步鉴定Polδ是由一个125 ku催化亚基和一个48 ku亚基组成的异二聚体[14]。