《表2 小牛胸腺Polδ的免疫亲和纯化》

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《哺乳动物DNA聚合酶δ分离纯化研究进展》


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1995年Jiang等[15]对上述传统的分离纯化方法进行了优化,其关键点在于利用了一个将抗p125单克隆抗体偶联到AvidChrom酰肼凝胶柱上制备而成的免疫亲和层析柱,再结合传统的层析柱,最终从750 g的小牛胸腺中获得了高达0.3 mg的Polδ(如表2所示)。该方法可以快速有效地分离由125 ku和50 ku亚基组成的Polδ二聚体复合物,且得率比传统方法有很大的提升,但该制备方法的缺陷是多次洗脱过程容易导致酶的失活,且Polδ纯化产物中通常含有许多多肽组分,纯度依然不理想。