《表1 本实验所用引物：C-5固醇去饱和酶ERG3对酿酒酵母耐盐性的影响》

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《C-5固醇去饱和酶ERG3对酿酒酵母耐盐性的影响》

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E R G 3敲除所用引物见表1，由上海生物工程有限公司合成，构建ERG3基因敲除盒步骤如下：1）以S.cerevisiae BY4741的DNA为模板，以ERG3-UF和ERG3-UR为引物进行PCR扩增构建上游同源臂，以ERG3-DF和ERG3-DR为引物进行PCR扩增构建下游同源臂；2）以质粒pUG6的DNA为模板，以kanMX-f和kanMX-r为引物进行PCR扩增，获得PCR产物loxP-kanMX-loxP；3）以ERG3-UF和ERG3-DR为引物，以上述3种PCR产物为模板，通过融合PCR构建ERG3基因敲除盒[9-10]。