《表1 引物/mimics序列》

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《miR-21通过PTEN/AKT减轻突变亨廷顿蛋白细胞毒性》


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小鼠抗Htt单克隆抗体由暨南大学李晓江教授惠赠,兔抗AKT(pan)、AKT(p-Ser473)和PTEN多克隆抗体购自Cell Signaling Technolog公司,小鼠抗GAPDH单克隆抗体购自Sigma公司。Trizol、ECL、蛋白Marker、BCA蛋白定量试剂盒、高糖DMEM培养基和胎牛血清(the fetal bovine serum,FBS)购于Thermo Fisher Scientific Inc.公司。逆转录试剂盒、双荧光素酶试剂盒购自Promega。辣根过氧化物酶标记山羊抗兔/抗小鼠IgG购自Jackson Immuno Research Laboratories。qPCR嵌合荧光法检测试剂盒购自TAKARA。细胞裂解液、上样缓冲液、Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒和青霉素-链霉素溶液购自江苏碧云天生物技术。miRNA-21 mimics和miRNA Negative control购自吉玛基因,按照说明书分别加DEPC水稀释至20μmol/L,使用时终浓度为80nmol/L,详细序列见表1。