《表1 Sc GAI与Sc GAI-C连接在不同表达载体上的引物序列》

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《甘蔗DELLA蛋白GAI基因的蛋白表达及纯化》

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所用引物如表1所示。利用In-fusion方法将ScGAI克隆（图1A）后与酶切后的pMal-c2X(BamHI、SalI）胶回收产物连接转入TOP10感受态中，挑单菌落进行菌液PCR检测（图1B）并测序验证。利用gateway方法将ScGAI和ScGAI-C（图1C）分别与pDONR211载体进行BR反应（图1D），提取质粒Mlu酶酶切（图1E）后，与pSPK2721载体进行LR反应，转入TOP10感受态后，挑单菌落进行菌液PCR检测（图1F）并测序验证。利用In-fusion方法将ScGAI-C（图1G）与pET28a+MBP载体（BamHI、XhoI双酶切）连接转化，挑单菌落进行菌液PCR检测（图1H）并测序验证。