《表2 杂交流程表：PCR-膜芯片技术在牦牛及犏牛肉制品的真假鉴定中的应用》

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《PCR-膜芯片技术在牦牛及犏牛肉制品的真假鉴定中的应用》

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（1）PCR产物变性：多重PCR产物95℃5 min使其解链，放置冰上备用。（2）膜芯片去活化：将制备好的膜芯片放入杂交盒内，芯片标签正面朝上，加入1 mL去活化液37℃孵育8min。（3）洗膜：加入1 m L去活化清洗液60℃洗脱5 min。（4）杂交：将变性后的PCR产物与1 mL杂交液充分混匀，放入水平摇床45℃，90 r/min孵育45 min。（5）洗膜：吸除杂交体系液，加入1 mL预热好的杂交清洗液，水平摇床52℃，90 r/min，震荡清洗5 min，洗涤2次。（6）孵育：吸除杂交清洗液，加入预热好的酶孵育液，42℃水平摇床90 r/min，震荡孵育30 min。（7）洗膜：吸除酶孵育液，加入1mL预热好的孵育清洗液1，42℃水平摇床90 r/min，震荡清洗5 min，洗涤2次；吸除孵育清洗液1，加入1 mL预热好的孵育清洗液2，37℃水平摇床90r/min，震荡清洗5 min，洗涤2次。（8）显色：吸除孵育清洗液2，加入1 mL显色液，37℃静置15min，吸除显色液，加入1 mL去离子水37℃洗涤2次，待膜芯片干燥后进行结果判读。具体流程如表2所示。