《表1 PCR引物序列:SENP1启动子G-四链体鉴定及其作用研究》

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《SENP1启动子G-四链体鉴定及其作用研究》


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根据从GenBank数据库查询的SENP1基因启动子区序列,设计合成特异性SENP1启动子PCR引物,并分别引入EcoR I和Bam H I酶切位点,引物序列见表1。以PC-3细胞基因组DNA为模板,利用引物F1和R3扩增SENP1启动子-2572~+1553片段,插入经EcoR I和Bam H I双酶切的pGluc Basic载体中,以构建SENP1启动子报告质粒SP1。再以测序正确的SP1质粒为模板,利用F1、F2和R1、R2、R3分别配对扩增SENP1启动子的不同片段,同样插入p Gluc Basic载体中,以构建不同的SENP1启动子报告质粒,将其依次命名为SP2~6。以He La细胞c DNA为模板,利用特异性引物扩增解旋酶G4R1基因片段,插入经Bam H I和Xho I双酶切的pCMV-N-Flag质粒中,以构建Flag-G4R1真核表达质粒。