《表1 mRNA引物序列(小鼠)》

《表1 mRNA引物序列(小鼠)》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《Snail介导的肺上皮间质转化在肌成纤维细胞活化中的作用》


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使用Tranzol up提取细胞总RNA,使用酶标仪测定样品总RNA浓度及纯度,用于对总RNA进行反转录以得到cDNA。将cDNA稀释3倍后,取1μL作为实时荧光定量PCR的模板,用于PCR扩增。反应条件为:预变性94℃,5 s;变性94℃,5 s;退火58℃,15 s;延伸72℃,10 s,共40个循环数。每个样品做3个复孔。上皮标志物E钙粘蛋白(E-cadherin,CDH1)、间质标志物α-SMA、核转录因子Snail、纤维化标志物COL1A1、COL3A1的Ct值经内参基因GAPDH标化后,根据2-ΔΔCt公式计算各样品相关基因的mRNA相对表达量。引物序列详见表1。