《表1 mRNA基因引物序列》

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《有氧运动联合水飞蓟宾对阻塞性黄疸小鼠模型肠黏膜屏障的影响》

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按照说明书使用高容量的c DNA逆转录试剂盒进行c DNA的合成。使用Prime ScriptRT Master Mix Perfect Real Time kit定量检测TLR4、NF-κB、TNFαmRNA表达水平，One Step Prime ScriptmiRNA c DNA Synthesis Kit试剂盒逆转录试剂盒和SYBR Green PCR Master Mix Kit（Applied biosystems）PCR试剂盒逆转录与定量miRNA-21基因水平。qRT-PCR使用CFX Connect PCR系统（BioRad，USA）进行40个循环，GAPDH和U6作为内部参照。根据GeneBank核酸数据库中神经组织各因子c DNA序列，TLR4、NF-κB、TNFαmRNA基因引物均由上海生工生物工程技术服务有限公司设计合成（表1），miRNA-21、U6（内参基因）亦按照miR Base database数据库中的碱基由广州Ribobio生物科技有限公司提供。PCR检测过程每样本设3个重复，测试结果采用2-△△Ct法计算组织中基因表达水平，ΔΔCt=实验组（Ct目的基因-Ct内参基因）-校正组（Ct目的基因-Ct内参基因）。