《表1 副溶血性弧菌RAA引物、cr RNA和RNA报告探针序列》

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《CRISPR-Cas13a结合重组酶介导的扩增快速检测副溶血性弧菌方法的建立》


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注:aRNA探针(RNA-probe)中前面带r的碱基为核糖核苷酸碱基;bT7 RNA聚合酶启动子序列;间隔(Spacer)序列。

根据设计的副溶血性弧菌CRISPR RNA(cr RNA)序列(见表1),合成用于体外转录cr RNA的模板(5′-ACGTAGAGCAA-GACGCGCTAAGATACGTGTTTTAGTCCCCTTCGTTTT TGGGGTA GTCTAAATCCCCTATAGTGAGTCGTATTA-3′,下划线为T7 RNA聚合酶启动子)。将模板与T7引物(5′-TAATACGACTCACTA TAGGG-3′)退火结合,采用T7 RNA聚合酶体外转录制备cr RNA。