《表2 耐药基因引物序列:副溶血弧菌养殖对虾分离株耐药性及耐药基因分析》
DNA提取采用TIANGEN细菌基因组试剂盒进行提取后对耐药基因进行PCR扩增。扩增体系一致,即DNA模板、正向引物(F)、反向引物(R)各1μL,Taq聚合酶12.5μL,无菌水定容至25μL。耐药基因引物参照文献,具体见表1。反应条件为95℃预变性5 min,95℃变性1 min、退火40 s(退火温度见表2),72℃延伸(延伸时间视产物长度而定),35个循环后72℃延伸10 min。PCR产物经1%琼脂糖凝胶120 V电泳30 min后,用凝胶成像仪器观察结果,并将目的产物送上海生工生物工程有限公司进行测序,测序结果经BLAST与已知序列比对以验证其基因型。
图表编号 | XD00121287400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.02.05 |
作者 | 魏文娟、赵姝、王元、周俊芳、李新苍、房文红 |
绘制单位 | 上海海洋大学、水产科学国家级实验教学示范中心、国家水生动物病原库、中国水产科学研究院东海水产研究所、农业农村部东海渔业资源开发利用重点实验室、中国水产科学研究院东海水产研究所、农业农村部东海渔业资源开发利用重点实验室、中国水产科学研究院东海水产研究所、农业农村部东海渔业资源开发利用重点实验室、中国水产科学研究院东海水产研究所、农业农村部东海渔业资源开发利用重点实验室、中国水产科学研究院东海水产研究所、农业农村部东海渔业资源开发利用重点实验室、中国水产科学研究院东海水产研究所、农业农村部东海渔业资源开发利用 |
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