《表3 试验所用引物：重组酿酒酵母发酵生产瓦伦西亚烯及其衍生物》

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《重组酿酒酵母发酵生产瓦伦西亚烯及其衍生物》

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注:下划线部分为酶切位点。

细胞色素P450单加氧酶HPO（Hyoscyamus muticus，Gen Bank:EF569601.1）、瓦伦西亚烯氧化酶Cn VO（Callitropsis nootkatensis，Gen Bank:JX518290）、CYP450还原酶At CPR（Arabidopsis thaliana，Gen Bank:NM＿118585.3），瓦伦西亚烯合成酶Cn VS（Callitropsis nootkatensis，Gen Bank:JX040471），由上海生工生物工程有限公司经密码子优化后合成。以公司合成的基因为扩增模板，用引物对HPO-U/D，CnVO-U/D，At CPR-F/R，VS-U/D分别扩增出HPO，CnVO，At CPR，CnVS四个基因片段，引入酶切位点Sma I、Bam H I。以酵母基因组为模板，ADH1-U/D，t HMG1-U/D为扩增引物对，从酵母基因组扩增得到ADH1和t HMG1，试验所需引物如表3所示。