《表2 食源性HAV和NoV检测过程中常用的过程控制类型》

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《小浆果中食源性甲型肝炎病毒和诺如病毒流行状况及检测方法的研究进展》

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注:N.D..没有相关数据。

在RT-P C R阶段，核酸反转录的平均效率仅为20%[103]，同一个RT-qPCR反应也会出现不同的扩增效率，因此在含有WPCs的核酸溶液中加入特定的DNA或RNA，是评估目标病毒RT-PCR抑制效应的有效方法。当RT-PCR过程控制的抑制指数小于2.0时，表明WPCs具有良好的提取效率，也表明RT-PCR扩增效果良好[90]。在食源性病毒的检测中，各种类型的DNA或RNA可以作为RT-PCR过程控制（表2）。其中，靶病毒的DNA质粒或RNA序列经常被用作RT-PCR控制[104-106]，这种控制可以和目标病毒采用相同的引物和探针进行检测。但是，当反应体系中存在抑制物质时，过程控制和目标病毒在同一反应管的扩增效率就很难准确计算。此外，使用该类RT-PCR控制容易引起待检核酸样品的污染，导致“假阳性”检测结果的产生。此外，在PCR反应体系中加入外部扩增控制也可以指示RT-PCR的抑制效应。该类过程控制与目的基因序列共用同一对扩增引物，通过扩增产物大小或荧光标记与靶病毒进行区分，避免了在PCR反应体系中多对引物间的相互作用，可用小浆果样品中病毒RT-PCR抑制效应的监测[64，80]。