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目录1

一、糖的定量测定1

(一)根据糖的还原性进行测定1

1.3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法1

2.Somogyi-Nelson法2

(二)将糖转变成糖醛衍生物进行测定3

1.地衣酚-硫酸法3

2.戊糖的测定(地衣酚法)5

3.苯酚-硫酸法6

4.蒽酮-硫酸法7

(三)酶法测定糖8

葡萄糖氧化酶法测葡萄糖8

二、糖的色谱法和电泳法10

(一)糖的纸色谱10

1.单糖和双糖的纸色谱10

2.寡糖和多糖的纸色谱18

3.多羟基醇的纸色谱18

4.糖酸的纸色谱19

6.糖内酯的纸色谱20

5.氨基糖的纸色谱20

7.糖磷酸酯的纸色谱21

(二)糖的柱色谱23

1.糖的活性炭柱分离23

2.蜂蜜中寡糖的炭柱分级法25

3.糖的离子交换树脂柱分离26

(三)糖的亲和色谱29

花生凝集素(PNA)亲和柱在糖分离中的试用34

(四)糖的气相色谱38

1.糖的三甲基硅醚衍生物39

2.糖腈乙酸酯衍生物41

3.糖醇乙酸酯衍生物43

4.糖的三氟乙酸酯衍生物46

5.果糖与葡萄糖或甘露糖共存时的气相色谱定量法48

(五)糖的高效液相色谱分析49

1.单糖和双糖的分析51

2.寡糖的分离和测定58

3.糖肟全苯甲酸酯紫外标记法分离和测定微量单糖和双糖62

(六)糖的薄层色谱65

(七)糖的电泳法68

1.红细胞膜上唾液酸的等速电泳68

2.多糖的滤纸电泳70

3.多糖的玻璃纤维纸电泳72

4.多糖的醋酸纤维薄膜电泳73

5.多糖的凝胶电泳73

三、糖链结构分析方法76

1.测定多糖分子量的方法原则77

(一)多糖的分子量测定和纯度鉴定77

2.渗透压法测定多糖分子量81

3.蒸气压法测定多糖分子量84

4.端基法测定多糖分子量86

5.光散射法测定多糖分子量90

6.粘度法测定多糖分子量97

7.高效液相色谱法测定多糖分子量101

8.多糖的纯度鉴定108

9.超过滤法及其在多糖化学研究中的应用111

1.糖的红外光谱法121

(二)糖的红外光谱、质谱和核磁共振121

2.糖的质谱法128

3.高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)脱机联用进行低聚糖146

的结构序列分析146

4.1H和13C核磁共振光谱在多糖上的应用150

(三)用于糖类结构分析的化学方法155

1.多糖的部分水解155

2.O-糖苷键的稀碱水解(β-消除反应)158

3.N-糖苷键的肼解法160

4.高碘酸氧化163

5.Smith降解164

6.甲基化反应(Hakomori,箱守仙一郎法)166

7.甲基化反应(硫酸二甲酯法)171

(四)糖苷酶及其底物的制备和测定173

1.一种产多糖链内切酶的微生物的培养以及内切酶作用条件173

2.从褶皱链霉菌(Streptomycesplicatus)分离提纯β-N-乙酰氨基葡萄糖苷内切酶-H175

3.β-甘露糖苷酶的分离提纯179

4.从土壤细菌中初步分离α-甘露糖苷酶和α(1→6)甘露聚182

糖内切酶182

5.枯草杆菌α-淀粉酶的分离纯化185

6.红色红曲霉α-葡萄糖苷酶的分离纯化188

7.茁霉多糖酶的分离纯化192

8.β-葡萄糖苷酶的分离纯化195

9.硝基苯酚糖苷化合物的有机合成200

各论209

一、微生物多糖和植物多糖209

(—)细菌胞外多糖的纯化209

粪产碱杆菌产粘变株(Alcaligenes faecalisvar.myxogenes)胞外酸性多糖的纯化210

(二)真菌多糖和植物多糖的研究方法211

1.斜顶菌(ClitopluscaespitosusPK)水溶性多糖的分离提纯213

2.香菇(Lentinusedodes)中碱溶性多糖的分离提纯214

3.大蒜球根中多糖的提取215

(三)酵母甘露聚糖的研究方法217

1.酵母甘露聚糖的分离提取218

2.选择性的乙酰解反应220

3.免疫学方法在酵母甘露聚糖结构研究中的应用222

二、海藻多糖226

1.褐藻中单糖的气相色谱分析227

(一)海藻和海藻多糖中单糖成分的测定227

2.红藻中D-半乳糖和3,6-内醚半乳糖的气相色谱分析229

3.红藻中D-半乳糖和3,6-内醚半乳糖的比色分析231

(二)红藻多糖234

1.红藻多糖的分离与提取236

2.红藻多糖物理性质的测定242

(三)褐藻多糖247

1.褐藻胶247

2.褐藻糖胶253

3.海带淀粉255

三、蛋白聚糖259

(一)蛋白聚糖(PG)和糖胺聚糖(GAG)的分离提取263

1.离子交换层析法分离蛋白聚糖(PG)264

2.糖胺聚糖(GAG)的一般提取方法266

3.透明质酸的分离提取267

4.4-硫酸软骨素的分离提取269

5.6-硫酸软骨素的分离提取270

6.软骨素的制备272

7.硫酸皮肤素的分离提取273

8.肝素的分离提取275

9.硫酸类肝素(或硫酸乙酰肝素)的分离提取277

10.硫酸角质素的分离提取279

11.刺参粘多糖的分离提取281

(二)糖胺聚糖(GAG)的组成分析及定量测定283

1.糖胺聚糖(GAG)的电泳法284

2.糖胺聚糖(GAG)各组分的定量分析290

(三)培养的动物细胞中蛋白聚糖(PG)的研究方法299

1.细胞培养和标记蛋白聚糖(PG)的提取300

2.离子交换柱层析分离蛋白聚糖(PG)303

3.凝胶过滤柱层析分离蛋白聚糖(PG)304

4.氯化铯(CsCl)等密度超速离心法分离蛋白聚糖(PG)305

5.糖胺聚糖(GAG)和寡糖的分离、鉴定及蛋白聚糖(PG)306

结构的分析306

6.硫酸二糖的分析312

四、神经鞘糖脂313

(一)神经节 苷脂的分离和纯化318

1.分配分离法318

2.离子交换法320

1.神经节 苷脂的定量——唾液酸含量测定322

(二)神经节 苷脂的鉴定322

2.薄板层析(TLC)法325

(三)中性糖脂的分离和纯化327

五、凝集素330

(一)凝集素的分离、纯化和鉴定333

1.凝集素的分离、纯化333

2.凝集素活力及纯度鉴定的一般方法341

(二)标记凝集素的制备345

1.放射性标记凝集素345

2.酶标记凝集素349

3.荧光标记凝集素351

4.铁蛋白标记凝集素354

(三)固相化凝集素的制备355

1.Sepharose4B的活化355

2.ConA-Sepharose4B的制备356

3.RCA-Sepharose4B的制备357

4.RCA-Sepharose4B(带己二胺“臂”)的制备357

附录有关糖类生化的文献查阅360

后记370

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