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第一章环境微生物检验的准备1

一、环境微生物检验常用设备1

（一）显微镜1

（二）其它仪器设备16

二、实验的准备工作17

（一）实验室的消毒17

（二）无菌室21

（三）器皿的洗涤22

（四）棉塞的准备24

三、样品的采集与处理25

（一）水样的采集与保存25

（二）垃圾的采集34

（三）土样的采集37

（四）气样的采集39

第二章环境工程微生物的基本操作技术47

一、光学显微镜使用方法47

二、光学显微镜的测微技术49

三、电子显微镜生物样品的制片技术51

四、培养基的制备58

五、灭菌63

（一）加热灭菌63

（二）过滤除菌68

六、接种技术71

七、制片技术76

八、染色技术78

（一）染色目的及其基本原理78

（二）各种染色方法78

（一）低温保藏法90

九、生物的菌种保存法90

（二）液体石腊保藏法（矿油保存法）91

（三）蒸馏水保存法92

（四）砂土管保藏法92

（五）冷冻干燥保存法93

第三章环境微生物分离的基本操作方法95

一、活性污泥或生物膜中微生物的分离方法95

二、水处理中主要微生物的分离培养100

（一）细菌的分离培养100

（二）放线菌的分离培养117

（三）酵母菌的分离培养118

（四）丝状真菌的分离培养119

（五）藻类的培养121

（六）浮游动物的培养126

第四章环境中微生物生物量的测定129

一、细菌总数的测定129

（一）直接计数法——血球计数板计数129

（二）染色涂片计数法131

（三）比浊度法132

（四）微生物细胞的重量测定法133

（五）自养菌数量的测定135

二、细菌活菌数的测定136

（一）平板菌落计数法136

（二）液体稀释法（MPN法）138

（三）滤膜过滤计数法143

三、应用分光光度计测定细菌数量144

四、测总氮量计算微生物量145

五、DNA含量的测定148

（一）福林－酚试剂法152

一、蛋白质水解酶活性的测定152

第五章活性污泥中微生物酶活性的测定152

（二）重氮法154

二、脂肪水解酶活性的测定156

三、淀粉水解酶活性的测定158

（一）活性污泥中液化型淀粉水解酶活力测定158

（二）活性污泥中糖化型淀粉酶活力测定159

四、纤维素水解酶活性的测定160

（一）3,5二硝基水杨酸法161

（二）塞氏比色定糖法162

（一）TF定量分析法163

五、脱氢酶活性的测定163

（二）MB·2H定性分析法165

六、微生物呼吸率的测定166

（一）瓦勃氏呼吸仪的工作原理167

（二）呼吸仪的主要构件和装置167

（三）反应瓶的常数计算168

（四）反应瓶体积的测定法168

（五）活性污泥悬浮液或微生物体止细胞的制备171

（六）检验方法172

（七）实验结果的计算174

（八）瓦氏呼吸仪的洗涤方法175

（九）汞的洗涤及保存177

七、ATP的测定178

（一）萤光素－萤光素酶测定ATP179

（二）含磷量测ATP180

八、厌氧污泥活性指标的测定182

（一）最大比产CH4速率和最大比COD去除速率182

（二）辅酶F420的测定186

（三）氢化酶189

（四）磷酸酯酶192

九、生物传感器测定微生物活性193

（一）固定化微生物膜的制备194

（二）生物传感器的安装195

（三）BOD的测定195

十、活性污泥泥龄及其控制196

（一）活性污泥泥龄的概念196

（二）活性污泥泥龄对系统运行特性的影响199

（四）活性污泥泥龄的控制202

（三）活性污泥泥龄的测定202

第六章环境工程微生物主要生理生化检测204

一、糖的氧化发酵204

二、淀粉水解的检验205

三、油脂水解的检验206

四、甲基红试验（M-R）207

五、乙酰甲基甲醇（V-P）试验207

六、柠檬酸盐利用试验209

七、含碳化合物的利用209

九、硝酸盐和亚硝酸盐的还原211

八、含氮有机化合物分解产氨试验211

十、明胶水解试验213

十一、脲素酶试验214

十二、石蕊牛奶试验215

十三、吲哚试验216

十四、硫化氢的产生217

第七章环境卫生学检验219

一、水的卫生细菌学检验219

（一）总大肠菌群的检验219

（二）细菌总数测定232

（三）粪大肠菌的检验233

（四）粪链球菌的检验235

（五）沙门氏菌的检验237

（六）志贺氏菌的检验240

（七）结核杆菌的检验242

二、游泳池水的卫生细菌学的检验243

（一）金黄色葡萄球菌的检验244

（二）绿脓杆菌的检验245

三、土壤卫生细菌学检验246

（一）沉降法248

四、空气卫生细菌学检验248

（二）滤过法249

（三）简易定量测定法250

五、肠道病毒——脊髓灰质炎病毒检验250

六、寄生虫学检验261

（一）寄生虫虫卵检查262

（二）寄生虫幼虫的检查265

（三）常见寄生虫卵及幼虫形态267

第八章环境的生物监测271

一、致突变物检测——Ames氏试验271

二、粪大肠菌抗生素敏感性分析和R－因子在细菌间转移检验282

三、发光菌对毒性废水检测法（MICROTOX法）290

四、水污染与净化中指示生物监测296

（一）采样297

（二）水样的浓缩301

（三）浮游生物的检测302

五、水体污染与自净中叶绿素a的检测307

六、藻类固碳量的测定311

七、蚯蚓对重金属元素吸收转化能力的检验313

八、硝化细菌对水及土壤中有毒物质的检测320

第九章微生物细胞及其酶的固定化325

一、微生物酶一般的提取及固定方法327

（一）酶提取的一般方法328

（二）微生物酶的一般固定化技术328

二、微生物细胞的固定化技术331

（一）微生物细胞的一般固定方法332

（二）活性污泥固定化334

（三）微生物酶与细胞共固定化337

附录338

主要参考文献441