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第一章光谱技术1

一、原理1

二、可见光和紫外光分光光度法3

三、荧光光谱分析法7

四、红外分光光度法12

五、操作实例13

实验一硷性磷酸酶Km值的测定13

实验二 吸收曲线的测绘15

实验三 紫外吸收法测定蛋白质含量16

实验四 尿中硫胺素荧光测定法18

实验五 尿中核黄素荧光测定法20

第二章离心技术23

一、原理23

二、制备性离心25

三、密度梯度制备29

四、分析性超速离心法30

五、操作实例33

实验一细胞核的分离33

实验二 大鼠肝细胞染色质的分离35

第三章电泳技术37

一、原理37

二、迁移率及其影响因素37

三、一般技术40

四、特殊技术45

五、电泳的应用50

六、操作实例51

实验一血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳51

实验二 盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质55

实验三 微量免疫电泳60

第四章层析技术63

一、原理63

二、吸附层析65

三、分配层析67

四、逆流分溶69

五、气相层析69

六、离子交换层析70

七、排阻层析72

八、亲和层析77

九、操作实例80

实验一凝胶层析分离血红蛋白和鱼精蛋白80

实验二 凝胶层析法分离血清红蛋白与糜蛋白醇82

实验三 离子交换柱层析分离氨基酸83

实验四 糖的薄层层析86

实验五 氨基酸的纸层析87

实验六 亲和层析法纯化胰蛋白酶89

第五章生物大分子的制备93

一、制备的根据93

二、制备方法分类93

三、制备程序93

四、细胞器的分离94

五、分离纯化96

六、操作实例97

实验一动物组织核糖核酸及脱氧核糖核酸的制备97

实验二 组织核酸的分离及定量103

实验三 蛋白质的盐析与透析106

实验四 猪胰蛋白酶的结晶和活力测定107

实验五 硷性磷酸酶的提取,分离与纯化112

附录114

一、溶液浓度的表示及其配制114

二、常用缓冲溶液的配制119

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