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生物化学实验基本知识1

一、实验课的目的要求1

二、生化实验室规则1

生物化学实验某些基本操作2

一、玻璃仪器的使用及清洁2

二、一般技术操作4

三、实验样品的制备5

常用的生物化学实验技术7

一、电泳法7

二、层析法11

三、比色和分光分析法18

四、离心法24

实验内容27

实验一蛋白质的沉淀与凝固27

实验二 蛋白质等电点的测定29

实验三 紫外吸收法测定蛋白质含量30

实验四 双缩脲法测定蛋白质含量31

实验五 改良酚试剂法测定蛋白质含量31

实验六 微量凯氏定氮法33

实验七 血清γ-球蛋白的分离、纯化及鉴定36

实验八 血清蛋白醋酸薄膜电泳40

实验九 血清蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳41

实验十 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子量43

实验十一 离子交换层析分离混合氨基酸47

实验十二 凝胶过滤层析脱盐和分离蛋白质48

实验十三 乳酸脱氢酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分离法49

实验十四 温度、pH、激动剂和抑制剂对酶活性的影响51

实验十五 底物浓度对酶促反应速度的影响53

实验十六 动物组织中核酸的提取和含量测定58

实验十七 酵母RNA的提取和鉴定63

实验十八 血糖的测定64

实验十九 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响68

实验二十 血清胆固醇测定69

实验二十一 甘油三酯的测定70

实验二十二 血清脂蛋白琼脂糖电泳72

实验二十三 脂类的薄层层析74

实验二十四 生物氧化实验75

实验二十五 线粒体的制备与P/O比值测定78

实验二十六 谷氨酸的氧化脱氨基作用79

实验二十七 血清尿素氮的测定82

实验二十八 血清丙氨酸氨基转移酶测定83

实验二十九 纸层析法鉴定转氨基作用85

实验三十 钾钠测定87

实验三十一 血清无机磷的测定90

实验三十二 血清钙的测定91

实验三十三 血清氯化物的测定93

实验三十四 血浆CO2结合力测定（滴定法）94

实验三十五 食物中维生素C的提取和定量95

实验三十六 胡萝卜素的柱层析分离法97

实验三十七 维生素B1的测定97

实验三十八 维生素B2的测定100

实验三十九 淀粉酶活性测定（碘—淀粉比色法）102

附录104

一、常用酸碱的比重和浓度104

二、常用酸碱指示剂104

三、常用缓冲液的配制105

四、常用试剂配制公式107

五、常用元素原子量原子价表108