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第一章引言 叶寅1

1.1 核酸的组成与结构1

1.2 核酸的变性与复性6

1.3 核酸酶与核酸的降解6

1.4 核酸的磷酸化与去磷酸化10

1.5 DNA合成与DNA聚合酶11

1.6 用于序列测定的载体系统14

1.7 分子克隆16

第二章序列胶及高压电泳系统 叶寅18

2.1 引言18

2.2 电泳装置系统19

2.3 序列胶的制备24

2.4 高压电泳29

2.5 序列胶电泳后的处理31

2.6 从序列胶片上读取DNA序列33

第三章DNA序列测定——测序策略 叶寅36

3.1 引言36

3.2 随机测序——建立随机重叠克隆文库38

3.4 利用核酸外切酶BAL 31构建嵌套系列缺失体66

3.5 利用外切核酸酶Ⅱ构建嵌套系列缺失突变体71

3.6 利用DNase I构建嵌套系列缺失突变体77

4.2 双脱氧链终止法测序原理82

第四章双脱氧链终止法——M13单链测序系统 王苏燕 叶寅82

4.1 引言82

4.3 Ｍ13系统——单链DNA的序列测定87

4.4 单链模板DNA的制备94

4.5 双脱氧测序反应98

4.6 双脱氧测序反应和序列胶中出现的问题113

4.7 多样品操作的程序化117

第五章双链DNA的序列测定 王苏燕 叶寅121

5.1 引言121

5.2 双链模板DNA的制备127

5.3 质粒DNA的变性——单链模板的获得136

5.4 测序反应138

第六章PCR用于序列测定 王铁辉142

6.1 引言142

6.2 对PCR双链产物测序146

6.3 不对称PCR产生单链测序152

6.4 直接PCR测序158

第七章银染测序 王苏燕167

7.1 引言167

7.2 银染测序168

7.3 测序中出现的问题及解决方法177

8.1 引言179

第八章非放射性标记的序列测定 范俊179

8.2 测序反应184

8.3 电泳及转膜188

8.4 显色反应189

8.5 结果举例及注意事项191

第九章DNA自动测序技术 沈天翔193

9.1 引言193

9.2 自动测序技术原理193

9.3 DNA模板的制备204

9.4 DNA聚合酶延伸反应207

9.5 序列胶的制备212

9.6 样品准备和电泳213

第十章DNA序列分析—M G法（化学降解法） 王苏燕215

10.1 引言215

10.2 化学降解法测序原理215

10.3 DNA样品的制备220

10.4 DNA样品的末端标记221

10.5 单末端标记DNA片段的分离和提纯224

10.6 合成的寡核苷酸DNA样品的5＇末端标记228

10.7 特异性的碱基化学裂解反应229

10.9 序列胶高压电泳及序列的阅读235

10.8 合成的寡核苷酸的M G测序法235

第十一章RNA序列分析 周志宏 田华松236

11.1 引言236

11.2 RNA的提取与纯化242

11.3 双向层析法249

11.4 酶法及化学法254

11.5 反转录酶法266

11.6 末端鉴定法273

第十二章核酸序列的计算机分析 徐军 陈润生276

12.1 计算机、软件和核酸数据库276

12.2 组装一个新测得的序列284

12.3 如何分析一个新测定的DNA序列291

附录308

一、各种不同用途的E.coli菌株308

二、各种培养基及抗生素310

三、放射性同位素313

四、核酸的性质314

五、一些经常使用的有机化合物的理化性质318

六、纯化核酸的试剂319

七、酶类及酶用缓冲液319

八、电泳321

九、序列载体322