《切片材料的染色方法-电镜技术》求取 ⇩

目 录1

作者前言1

第一章引言1

1·1切片染色的目的2

1·2组织固定8

1·2·1作初固定剂用的醛类9

1·2·2几个化学问题10

1·2·3固定程序14

1·3组织制备14

1·3·1获得薄组织片的简单方法15

1·3·2组织切片机17

1·3·3组织切片的定向18

1·3·4特殊包埋技术19

1·4实验室的安全20

第二章 电镜技术中的细胞学染色方法27

2·1光镜观察用的厚树脂切片28

2·1·1厚切片的处理28

2·1·2光镜用树脂切片的染色29

2·2处理超薄切片的程序32

2·2·1载网上切片的染色33

2·2·2未载网超薄切片的染色38

2·2.3除去超薄切片上的锇39

2·2·4染色程序的选择39

2·3铅染色剂43

2·3·1铅染的一般程序43

2·3·1 a 氢氧化铅水溶液染色程序44

2·3·2碱性铅盐溶液染色45

2·3·2 a 铅染法A（Karnovsky 1961）45

2·3·2 b 铅染法B（Karnovsky 1961）46

2·3·2 c 铅染法C——酒石酸铅染色法（Millonig1961）46

2·3·2 d 铅染法D——枸橼酸铅染色法（Reynolds1963）46

2·3·2 e 铅染法E——枸橼酸铅染色法（Venable和Coggeshall 1965）47

2·3·2 f 铅染法F——枸橼酸铅染色法（Fahmy1967）47

2·3·3铅染液的用途48

2·4醋酸双氧铀48

2·4·1醋酸双氧铀酒精溶液49

2·4·2铀盐水溶液49

2·4·3醋酸双氧铀块染程序50

2·5双染法52

2·6其它细胞学染色剂56

2·6·1四氧化锇57

2·6·1 a 锇－硫卡巴肼－锇法59

2·6·2磷钨酸60

2·6高锰酸钾62

2·6·4证实生物胺的方法64

2·6·5其它非特异染色法67

2·7电镜技术中的示踪剂67

2·7·1真溶液中的小分子68

2·7·1 a 硝酸鑭和钌红69

2·7·1 b葡糖酸亚铁在体内的应用70

2·7·2 a 胶体金的制备方法72

2·7·2胶体粒子72

2·7·3酶和金属蛋白质74

第三章普通细胞化学方法92

3·1现有技术的局限性92

3·2广谱特异性细胞化学方法94

3·2·1证实酸性或硷性基团的程序94

3·2·2某些羟基的染色剂——乙醇铊95

3·3核酸染色法97

3·3·1核酸的一般染色法97

3·3·1 a 核酸的三氯化铟染色法97

3·3·1 b核酸的钨酸钠染色法99

3·3·1 c 核酸的醋酸双氧铀染色法99

3·3·2 DNA的特异染色法100

3·3·2 a DNA的富尔根－六亚甲四胺银染色法101

3·3·2 b DNA的富尔根－席夫－乙醇铊染色法101

3·3·3 R NA的选择性染色105

3·4蛋白质的一般染色法107

3·4·1丙烯醛在蛋白质染色中的应用107

3·4·2蛋白质的磷钨酸染色法108

3·4·3硫氢基的特异染色法109

3·4·3 a 高硫蛋白质的染色法111

3·5碳水化合物的特异染色法114

3·5·1过碘酸氧化法的特异性115

3·5·1 a 醛基阻断法117

3·5·2碳水化合物的过碘酸－六亚甲四胺银染色法117

3·5·3碳水化合物的氨基硫脲－蛋白质酸银染色法119

3·5·4碳水化合物的过碘酸－碱性？染色法122

3·6酸性粘液物质的染色法123

3·6·1含铁溶液的应用124

3·6·2用铁溶液块染酸性粘液物质的方法125

3·6·3用铁染超薄切片酸性粘液物质的方法126

3·6·4用胶体钍染酸性粘液物质的方法126

3·6·5酸性粘液物质的其它染色法128

3·7脂类染色法130

3·7·1保存脂类用的特殊脱水和包埋方法131

3·7·2保持脂类的氨基塑料包埋剂131

3·7·2 a 戊二醛－卡巴肼混合物 （GACH）包埋133

3·7·2 b 戊二醛－尿素混合物（GUR）包埋134

3·7·2 c 戊二醛－尿素乙二醇甲基丙烯酸酯共聚体（GUGM）包埋135

3·7·3用毛地黄皂甙保存胆固醇136

3·7·4磷脂的保存138

3.8无机离子沉淀法139

3·8·1用焦锑酸盐沉淀钠139

3·8·2钙离子的显示法140

3·8·3磷酸盐离子的沉淀141

3·8·4氯化物离子的沉淀142

3·8·5显示重金属的方法142

3·9提取方法144

3·9·1某些固有的困难145

3·9·2核酸的提取147

3·9·3蛋白水解酶的应用148

3·9·4多糖的提取150

第四章水解酶的金属沉淀法167

4·1酶细胞化学原理167

4·1·1一些理论上的考虑169

4·1·2理论上的一些推论173

4·1·3孵育阶段的细则174

4·2酶细胞化学的一些实际问题178

4·2·1孵育用组织样品的制备179

4·2·2孵育时可能产生的问题182

4·2·3孵育后遇到的问题184

4·2·4一个典型的孵育程序187

4·3酸性水解酶的染色方法189

4·3·1酸性磷酸酶的显示法190

4·3·2酸性磷酸酶的常规染色法191

4·3·3酸性单核苷酸酶的显示法194

4·3·4核苷酸二磷酸酯酶，特别是硫胺焦磷酸酶的显示法195

4·3·5硫酸酯酶技术197

4·4水解ATP的酶类199

4·4·1命名问题200

4·4·2某些组织化学的复杂问题201

4·4·3一种用铅离子显示ATP酶的可能方法204

4·4·4用锶离子显示运载ATP酶211

4·4·5腺苷酸环化酶的显示法213

4·5·1碱性磷酸酶技术215

4·5其它磷酸酶215

4·5·1 a 钙作捕捉离子的用法219

4·5·1 b 胞苷一磷酸作底物的用法219

4·5·1 c 枸橼酸盐作螯合剂的用法220

4·5·2葡萄糖－6－磷酸酶技术221

4·5·2 a 推荐一个证实葡萄糖－6－磷酸酶的方法223

4·6一般性酯酶技术224

4·6·1现用技术的总特异性224

4·6·2用于酯酶的硫赶醋酸原法228

4·6·2 a 一个简单的硫赶醋酸方法228

4·6·3两个改进的酯酶方法229

4·6·3 b 铅－乙酰二硫化物法230

4·6·3 a纯硫赶醋酸的制备230

4·6·3 c 金－硫赶醋酸盐法232

4·6·4酶抑制物的重要性233

4·6·5用于酯酶的金－苯硫酚盐法234

4·6·5 a 对硝基苯硫赶醋酸盐（PNPTA）的合成235

4·6·5 b 推荐的PNPTA孵育程序235

4·6·6 8－羟基喹啉在证实酯酶上的可能用法236

4·7胆碱酯酶的特异方法237

4·7·1现用实验方法概况237

4·7·2铜－硫代胆碱法在组织化学上的某些局限性238

4·7·3各种铜－硫代胆碱法的比较240

4·7·4用于胆碱酯酶的铜－甘氨酸常规方法243

4·7·4 aTennyson-Brzin法243

4·7·4 b Kasa-Csillik法244

4·7·4 c Lewis-Shute法245

4·7·4d 一种可变通的简单孵育程序247

4·7·4 e 抑制剂和替换底物的用法249

4·7·5胆碱酯酶的铜－铁氰化物染色法251

4·7·5 a 标准的铜－铁氰化物染色法253

4·7·5 b 硒代胆碱酯的用法254

4·7·6胆碱酯酶的金－硫代胆碱法255

第五章其它酶细胞化学方法273

5·1氧化酶的组织化学274

5·1.1DAB在氧化酶组织化学中的应用276

5·1·1 a 过氧化物酶活性的显示279

5·1·1 b 细胞色素氧化酶和线粒体染色281

5·1·1c 过氧化氢酶和微体的染色283

5·1·1 d 内源性非酶促染色285

5·1·1 e细胞色素C的检出285

5·1·1 f相关化合物的应用286

5·1·2 DOPA－氧化酶法287

5·1·3其它氧化酶法290

5·2脱氢酶组织化学的生化基础291

5·2·1呼吸链概述291

5·2·2氧化磷酸化作用和组织化学抑制剂293

5·2·3组织化学的应用296

5·3铁氰化物的用法297

5·3·1线粒体对铁氰化物的还原作用298

5·3·2琥珀酸脱氢酶的显示300

5·3·3其它脱氢酶的显示303

5·3·4α－羟酸氧化酶的检出技术305

5·3·5增强初发亚铁氰化物沉淀反差的方法306

5·4四唑盐的用法307

5·4·1琥珀酸脱氢酶的染色程序311

5·4·2递氢酶活性的染色程序312

5·4·3乳酸脱氢酶的染色程序313

5·4·4其它脱氢酶的染色314

5·5偶氮染料的偶联技术314

5·5·1偶氮染料技术的缺点316

5·5·2有关六偶氮副蔷薇苯胺的方法317

5·5·2 a 六偶氮副蔷薇苯胺的制备318

5·5·2 b萘酚酯作底物的用法319

5·5·2 c 吲？酚酯作底物的用法320

5·5·3芳基硫酯作底物的用法322

5·5·3 a 酯酶的染色法323

5·5·3 b用于其它酶的可能性324

5·5·4氨基肽酶的显示325

5·5·5含重金属重氮盐的用法328

5·6某些转移酶的可能染色法329

5·6·1转氨酶的铅－草醋酸盐染色法329

5·6·2鸟氨酸氨基甲酰转移酶的建议方法331

5·6·3酰基转移酶的染色方法333

5·7酶细胞化学的展望335

附录Ⅰ贮备液355

附录Ⅱ 常用试剂与器材的供应厂商目录362