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第一部分基础理论1

第一章 染色体的基本知识1

第一节 染色体的研究历史1

第二节 染色体的结构8

一、染色质与染色体8

二、染色体的化学组成10

第三节 人类染色体的形态特征12

第四节 体细胞有丝分裂13

一、间期的特点15

二、有丝分裂期的特点15

一、减数分裂的基本过程18

第五节 生殖细胞减数分裂（成熟分裂）18

二、人类生殖细胞的减数分裂23

（一）男性生殖细胞的减数分裂23

（二）女性生殖细胞的减数分裂24

第二章 人类染色体的变异、异常及其产生原因26

第一节 表型正常个体的染色体变异与多态现象26

一、长度28

二、随体28

三、副缢痕29

四、嵌合现象31

五、Q、G和C带的多态性31

第二节 染色体数目异常及其产生原因31

（一）多倍体32

一、数目异常的类型和产生原因32

（二）非整倍体34

二、结构畸变的类型和产生原因43

（一）缺失44

（二）倒位44

（三）易位46

（四）重复49

（五）环状染色体50

（六）等臂染色体52

（七）双着丝粒染色体52

（八）多射体52

一、分裂中期染色体55

第一节 人类染色体的识别55

第三章 人类染色体的鉴定55

二、正常人核型56

三、非显带染色体的识别59

四、各种显带方法对各个染色体的识别62

（一）染色体带的识别67

（二）正常人的Q带带型69

（三）正常人的常规G带带型74

（四）G带和R带80

（五）人类染色体的高分辨显带与Q带带型的特征和识别80

五、染色体测量97

（一）命名符号98

六、放射自显影98

七、异常染色体的命名和描述方法98

（二）非显带染色体的染色体结构畸变101

（三）用断裂点和染色体带的组成表示染色体的结构异常103

八、异形（可变）的染色体区114

（一）非显带染色体的副缢痕或随体的变化114

（二）显带染色体的异形区的变化115

九、获得性染色体畸变的命名118

（一）染色单体畸变118

（二）染色体畸变120

（三）畸变的记录124

（五）肿瘤细胞群体125

（四）具有获得性异常的细胞群体125

十、人类减数分裂染色体的识别与命名法128

（一）男性减数分裂染色体的鉴别128

（二）人类减数分裂染色体的命名法129

第四章 染色体异常及其主要类型136

第一节 常染色体综合征136

一、三体综合征136

（一）21三体综合征136

（二）18三体综合征141

（三）13三体综合征141

（四）8三体综合征142

（五）9三体综合征143

（二）4p部分三体综合征144

二、部分三体综合征144

（一）4p部分三体综合征144

（三）9p部分三体综合征145

（四）20p部分三体综合征145

三、部分单体综合征145

（一）4 p部分单体综合征（4p-综合征）145

（二）5p部分单体综合征（5p-综合征）146

第二节 性染色体综合征147

一、Turner综合征147

（一）X单体型（45，X）147

（五）X短臂缺失（46，XXp-）148

（六）X长臂缺失（46，XXq-）148

（三）X长臂等臂〔46，X，I（Xq）〕148

（四）X短臂等臂〔46，X，I（Xp）〕148

（二）嵌合型（45，X/46，XX；45，X/47，XXX；45，X/46，XX/47，XXX）148

（七）环状X染色体〔46，Xr（X）〕150

二、X三体综合征150

三、47，XXY综合征151

四、47．XYY综合征151

五、真两性畸形152

（一）46，XY/46，XX嵌合型152

（二）46，XX/47，XXY嵌合型152

（四）46．XX型153

第三节 染色体脆性部位153

（三）46，XY/45，X嵌合型153

一、脆性X染色体综合征155

（一）脆性X染色体的特征156

（二）脆性部位形成的机制156

（三）脆性X染色体携带者与携带者的检出157

（四）脆性X染色体综合征的特点158

（五）脆性X染色体综合征的治疗159

二、常染色体脆性部位159

（一）常染色体脆性部位与智力低下159

（二）常染色体脆性部位与肿瘤的关系159

第四节 染色体平衡易位携带者160

第五节 减数分裂时的染色体异常163

第六节 肿瘤的染色体异常165

一、一些与肿瘤染色体有关的基本概念165

二、肿瘤染色体的数目和结构异常166

（一）数目异常166

（二）结构异常和标记染色体166

（三）肿瘤染色体畸变举例167

三、染色体异常在肿瘤发病中的意义169

（一）肿瘤染色体异常的非随机性169

（二）两类染色体畸变170

四、染色体畸变和癌基因170

五、染色体不稳定综合征和肿瘤171

一、母亲年龄172

第七节 染色体异常的病因学172

二、辐射174

三、感染175

四、药物及化学物质176

五、家族性趋势176

第五章 性染色质179

第一节 X染色质179

一、发现与命名179

二、Lyon假说179

三、X染色质的形状和阳性率181

第二节 Y染色质181

第六章 染色体异常与皮肤纹理184

（一）指纹类型185

第一节 正常人的皮肤纹理185

一、指纹185

（二）各类指纹的频率187

（三）嵴纹数目的计算188

二、手掌纹189

三、指褶纹和手掌褶纹191

四、脚掌纹193

五、几种常见的染色体病患者的皮肤纹理195

（一）先天愚型195

（六）Turner综合征（45，X）197

（四）5p-综合征197

（五）4p-综合征197

（三）18三体综合征197

（二）13三体综合征197

（七）Klinefelter综合征198

第二部分实验技术201

第七章 实验室的基本设备201

一、实验室201

二、仪器设备201

第八章 器材的准备204

第一节 器材的清洗204

一、清洁液的配制204

三、玻璃细菌滤器的处理205

二、一般玻璃器皿的处理205

四、橡胶类制品的处理206

五、载玻片的处理206

六、盖玻片的处理206

第二节 灭菌207

一、干热灭菌207

二、高压灭菌207

三、过滤除菌208

第九章 培养液和常用溶液的配制210

第一节 细胞培养液210

一、RPMI 1640培养液的配制210

三、Eagle（MEM）培养液的配制211

第二节 有丝分裂原—植物凝血素的提取211

二、Eagle 培养液的配制211

一、盐水提取法212

二、酒精乙醚提取法213

三、简易提取法214

第三节 血清的分离与灭活214

第四节 抗生素与抗凝剂214

一、抗生素214

二、抗凝剂215

第五节 纺锤体抑制剂——秋水仙素或秋水酰胺216

第六节 其它溶液217

（一）低渗溶液217

（二）固定液217

（三）染色液218

（五）无钙镁磷酸缓冲液（PBS）219

（六）0.25%胰蛋白酶溶液219

（七）0.02%乙二胺四乙酸（EDTA）溶液219

（八）胰蛋白酶-EDTA混合液220

（九）5%碳酸氢钠（NaHCO3）溶液220

（十）D-Hank液（无钙、镁Hank液）220

（十一）不同浓度的酒精稀释表220

（十二）常用的不同浓度溶液的配制221

（十三）SSC（氯化钠、柠檬酸钠）溶液222

（十四）Earle平衡盐溶液222

（十五）Macllvaines缓冲剂223

（十六）柠檬酸磷酸盐缓冲液（pⅡ5.）223

一、常规培养法与标本制作225

第十章 人体细胞的培养与染色体标本的制备225

第一节 人体外周血白细胞的培养与染色体标本制作方法225

二、半微量全血培养法232

第二节 标本的染色234

一、Q显带技术234

（一）标本的制作235

（二）染色方法235

（三）脱色方法236

（四）镜检236

（五）照相237

二、G显带技术237

（二）显带程序238

（一）标本的准备与溶液配制238

（三）影响G显带效果的一些因素239

（四）改良的G显带直接染色法239

（五）G显带直接染色法（热蒸气-双氧水法）241

三、R显带技术241

四、C显带技术244

五、DA-DAPi染色246

（一）操作方法246

（二）注意事项246

七、同一标本上作多种染色247

（一）C带配合另一种显带方法247

六、Cd显带技术247

（二）G显带配合Q显带248

（三）Q显带之后用ASG法进行C显带248

（四）常规染色配合Q显带249

第三节 高分辨显带染色体标本的制作249

一、获得高分辨染色体标本的方法249

（一）同步拦截法250

（二）阻止染色体收缩法251

二、高分辨显带染色体标本制作程序252

（一）氨甲蝶呤同步法252

（三）双同步化法253

（二）过量胸苷同步法253

（四）放线菌素D法254

（五）吖啶橙法254

（六）溴乙锭法254

三、高分辨染色体的分散和显带255

（一）瑞氏染液直接显带法256

（二）Hoechst 33258加紫外线照射显带法256

第四节 染色体的特殊分化染色技术257

一、螺旋结构的显示257

二、增强副缢痕显现的方法258

三、第9号染色体的异染色质节段的显示259

四、第9号染色体的异染色质节段及某些特定染色体的其它着丝粒区的显示259

一、骨髓细胞是染色体分析的良好材料262

二、骨髓染色体标本的制备262

第一节 骨髓细胞的染色体262

第十一章 骨髓和肿瘤染色体标本的制作262

（一）Hozier等人的方法263

（二）Mitelman等制备白血病骨髓染色体的方法263

（三）同步化方法264

（四）透明质酸酶法266

三、白血病患者的外周血染色体直接制片法266

第二节 实体瘤染色体标本的制作268

一、实体瘤染色体标本制作的困难268

二、实体瘤染色体标本的制作程序268

（一）直接法268

（二）胶原酶消化后短期培养法269

（三）针刺取材法271

（四）改良的实体瘤染色体直接制片法272

第三节 瘤细胞株染色体标本的制作273

第四节 胸腹水恶性细胞染色体标本的制作274

第十二章 其它组织的染色体标本制作277

第一节 绒毛细胞的取材、培养与染色体标本的制作277

一、绒毛的取材277

（一）绒毛囊在早孕时期的变化特点277

（二）取材时间278

（三）取材器械与方法278

二、绒毛细胞染色体标本的制作方法280

（一）改良法Ⅰ280

（二）改良法Ⅱ281

（三）改良法Ⅲ282

（四）绒毛细胞高分辨染色体的制片技术283

第二节 羊水细胞的培养与染色体标本的制作技术285

一、培养286

（一）培养液的配制286

（二）羊水的采集与羊水细胞的接种286

（三）羊水细胞的培养287

二、制片287

三、有关羊水细胞培养与制片的一些问题289

四、羊水细胞高分辨染色体标本的制作技术290

（一）选取加入BrdU的最适时间与最适浓度292

（二）制片方法292

五、羊水细胞姐妹染色单体交换标本的制作方法292

第三节 皮肤培养与染色体标本的制作294

一、活检取材294

二、原始培养物的建立295

三、传代培养298

（一）传代培养的方法298

（二）染色体标本的制作298

四、传代培养细胞的冰冻保存和复苏299

第四节 细胞株的建立与保存300

一、细胞株与建立细胞株的意义300

二、细胞株的建立300

（一）建立细胞株的步骤300

（二）鉴定302

三、细胞株的冰冻保存304

一、培养液的配制和标本制作305

第五节 染色体脆性部位标本的制作305

二、镜检分析306

第六节 姐妹染色单体交换与姐妹染色单体交换标本的制作307

一、标本的制作309

二、镜检分析309

第七节 银染核仁形成区与银染近端着丝粒染色体随体联合310

一、制片方法311

（一）Denton等的方法311

（三）Ag-Ⅱ法312

（四）简易方法312

（二）Ag-Ⅰ法312

二、标本的观察分析313

三、银染与G显带的复合显示法314

第八节 微核标本的制作315

一、标本制作315

（一）未经培养的淋巴细胞315

（二）培养的淋巴细胞316

二、观察分析方法317

第九节 人类迟复制X染色体的标本制作317

一、BrdU-吉姆萨法317

二、BrdU-吖啶橙荧光染色法318

三、BrdU-Hoechst 33258染色法319

第十节 人精子染色体标本的制作319

一、人精液的采集320

二、金黄地鼠卵细胞的制备321

三、受精322

四、受精卵的培养322

五、染色体标本的制作322

六、注意事项323

第十三章 减数分裂染色体标本的制作326

第一节 睾丸组织的染色体标本制作326

一、第一次减数分裂前期326

（一）Ohno压片法（不进行低渗预处理）326

（二）Hungerford的低渗预处理法327

（三）改良的Meredith法328

（一）Ohno压片法（进行低渗预处理）329

二、第一次和第二次减数分裂中期329

（二）陈氏气干制片法（进行低渗预处理）330

第二节 人卵巢组织的染色体标本制作331

一、第一次减数分裂前期331

（一）Ohno压片法（不进行低渗预处理）331

（二）火焰干燥法（不进行低渗处理法）331

二、第一次和第二次减数分裂中期332

第三节 减数分裂染色体的显带333

一、C显带法333

二、Q显带法333

三、G显带法334

二、标本的制作336

一、取材336

第十四章 X染色质与Y染色质标本的制作与观察336

第一节 口腔粘膜细胞336

三、染色337

四、观察分析339

第二节 尿液中的脱落细胞344

第三节 毛囊细胞344

一、标本制作344

二、染色345

第四节 外周血白细胞的Y染色质345

第五节 生殖道细胞346

第六节 精子的Y染色质346

一、组织的固定、包埋和切片347

第七节 活检组织、尸检组织（包括流产儿组织）的性染色质检查347

二、X染色质的染色（改良Klinger和Ludurig的硫堇染色法）348

三、Y染色质的染色348

四、在同一组织中显示X和Y染色质349

第八节 羊水细胞350

第九节 绒毛细胞350

一、取材与制片351

二、X染色质染色351

三、Y染色质染色352

第十节 羊膜细胞和脐带细胞352

二、脐带细胞的Y染色质353

一、羊膜细胞的X染色质353

第十一节 间期癌细胞的Y染色质354

第十五章 染色体的显微照相技术356

第一节 显微照相装置356

（一）自动（或半自动）显微照相装置356

（二）大型照相机装置356

（三）小型照相机装置357

第二节 照相的步骤358

一、滤色片的选择358

二、胶片（感光片）的选择358

（一）胶片的种类及其用途358

（二）胶片的选择359

三、摄影操作360

四、曝光与试拍361

第三节 洗印361

一、显影液、定影液的配制361

（一）显影液361

（二）定影液363

二、底片的显影与定影364

三、相纸（感光纸）的显影与定影364

附录一 染色体综合征的检出指征367

（一）染色体综合征患者中常见特征的典型图像367

（二）检出指征概述369

附录二 染色体分析准则（草案）378