《生物材料的电子显微镜研究法》

概述1

引论［Η.Α.基谢列夫］1

序言3

第一章 电子显微镜研究中支持膜的制备方法和它在载网上的放置［Β.И.比留佐娃］8

1.载网和隔板的精制8

2.支持膜的制备10

硝化纤维支持膜11

福尔蒙瓦尔支持膜13

用真空喷涂法获得的支持膜15

碳支持膜15

石英支持膜16

氧化硅支持膜17

多孔膜的制备17

3.支持膜在载网上的放置19

1.由悬液制备标本的方法23

第二章 细菌、病毒、噬菌体类型生物材料的研究方法［А.С.季霍年柯］23

2.类复型法25

离心提纯26

透析提纯及点滴透析26

3.研究材料与培养基分离提纯的方法26

琼脂过滤法提纯29

4.微生物在膜上的培养方法30

5.提高反差的方法33

负增差法33

正增差法35

第三章 投影法和复型法［Н.А.基谢列夫］37

1.投影法37

概述37

用于投影的金属42

各种金属的蒸发方法44

投影所必需的金属量确定45

投射角、支持物和粒子大小的选定49

2.复型法51

复型样品的喷涂处理54

复型样品的投影处理55

铂和碳(或石英)的同时蒸发57

复型样品的分辨率58

3.在研究各种材料时投影法和复型法的运用58

核酸分子的研究59

蛋白质晶体的复型样品62

核蛋白体、噬菌体、病毒、细菌等类型材料的研究63

组织的复型样品66

运用二级复型法制备复型样品66

冰冻状态下干燥颗粒的复型样品67

化学固定剂的类型71

第四章 生物材料超薄切片的研究方法71

1.固定［В.П.基略夫］71

电子显微镜研究中组织固定的一般原则和条件72

固定剂在组织中的渗透速度和材料用量72

固定温度条件73

用于固定的组织块之分离73

四氧化饿固定法74

OsO4的化学特性及其生物结构的相互作用74

Palade锇酸固定剂76

Sjostrand锇酸固定剂78

在锇酸蒸汽中固定79

Caulfield固定剂80

Dalton铬-锇固定剂81

Luft高锰酸钾固定法81

福尔马林固定法82

动植物组织的福尔马林固定法84

微生物、病毒和噬菌体的固定条件84

在悬液中微生物的固定84

用以制备超薄切片的微生物的固定85

低压干燥88

2.脱水［Ю.С.钦佐夫］90

材料的洗涤90

脱水过程91

3.包埋［Ю.С.钦佐夫］93

甲丙塑料包埋94

包埋用的甲丙塑料的制备94

包埋的操作程序96

用以制备超薄切片的微生物的甲丙塑料中的脱水和包埋101

在甲丙塑料中包埋的缺点及其消除102

明胶包埋103

其它包埋材料104

环氧树脂104

Vestopal W108

特殊的包埋方法和标本的定向108

在小浅槽中包埋109

倒转胶囊包埋110

4.聚合体切片的制备［Ю.С.钦佐夫］112

第五章 超薄切片术［В.Л.鲍罗维亚金］119

超薄切片刀119

适于制刀的玻璃的特征120

制作玻璃刀的方法121

玻璃刀质量的检查129

切片水槽的制作131

超薄切片机的构造132

在超薄切片机上工作的一般规则135

LKB-Sjostrand和LKB-4800超薄切片机的一些工作特性139

切片的展开141

切片厚度的测定142

切片向载网的转移142

制作切片过程中的故障145

防止切片在电子流作用下发生变化的方法147

第六章 组织和切片的补充处理［Ю.С.钦佐夫］151

1.组织块的染色151

2.切片的染色152

用铀盐提高反差152

用磷钨酸(ФВК)和磷钼酸(ФΜК)提高反差153

用高锰酸钾提高反差153

用铅盐提高反差154

组织切片中低价锇氧化物的洗除156

用银盐染色156

В.П.Гклёв切片负增差157

在光学显微镜中厚丙塑料切片的研究157

3.用于电子显微镜研究中的组织化学反应158

酶的显示159

硫氢基的显示163

核酸的显示163

用酶处理切片以鉴定DNA、RNA和蛋白质165

糖原的鉴定166

放射自显影167

第七章 与电子显微镜工作有关的一些技术问题［В.Л.鲍罗维亚金］170

电子显微镜放大率的校准170

电子显微镜分辨率的测定和显微照象上分辨率的估计173

照象176

内容索引184