《酶标记免疫技术的原理方法和应用 上》求取 ⇩

目录1

第一章 绪言1

第二章 酶的基本知识8

一、酶的发现8

二、酶的作用特点9

三、酶的作用原理及动力学11

（一）酶的作用原理11

（二）酶的活性部位（活化中心）12

（三）影响酶促反应的因素13

第三章 酶免疫微量分析技术原理23

一、均一性酶免疫测定法（HEI）23

（一）HEI的基本原理24

（二）常用的几种HEI方法25

二、非均一性酶免疫测定法34

（一）竞争性ELISA35

（二）非竞争性ELISA40

（三）葡萄球菌A蛋白ELISA（PPA-ELISA）45

（四）酶标记抗原抗体定位技术53

第四章 免疫血清及纯化抗体、抗原的制备57

一、免疫血清的制备57

（一）免疫动物所用的抗原57

（二）佐剂58

（三）免疫动物的选择59

（四）免疫方法60

（一）盐析法（盐）63

二、抗体的纯化63

（二）凝胶过滤（分子筛层析）66

（三）离子交换层析76

（四）亲和层析84

（五）抗体纯化实例—IgG型抗体的纯化88

三、可溶性抗原的制备和纯化88

（一）可溶性抗原的制备88

（二）可溶性抗原的纯化89

四、葡萄球菌A蛋白的提取和纯化90

（一）粗提SPA的制备91

（二）SPA的纯化95

五、纯化抗体或抗原蛋白质含量的测定96

（一）紫外光吸收法96

（二）Folin—酚试剂反应法98

第五章 酶标记物的制备100

一、酚标试验中常用的酶100

（一）均一性酶标试验常用的酶100

（二）非均一性酶标试验常用的酶101

二、酶标记物的制备104

（一）戊二醛交联法104

（二）过碘酸钠（NaIO4）氧化法108

（三）二马来酰亚胺键法110

（四）酶标记半抗原的制备111

三、酶结合物质量检查指标112

（一）标记效果及酶结合物活性测定112

（四）酶结合物质量评定113

（三）定量指标113

（二）酶结合物产率测定113

第六章 酶联免疫吸附试验（ELISA）115

一、材料、溶液和仪器115

（一）固相载体115

（二）溶液配制119

（三）国产酶标测定仪121

二、ELISA技术122

（一）包被122

（二）洗涤125

（三）加待检标本126

（四）洗涤127

（五）加酶标记物127

（六）洗涤128

（七）加底物128

（八）终止反应128

（九）结果判断129

（十）特异性考核130