《免疫化学技术 上》求取 ⇩

前言1

一、免疫化学基本技术1

（一）、盐析1

目录1

（二）、脱盐3

1、半透膜透析3

2、凝胶过滤法3

3、超过滤法＊3

2、表面蒸发浓缩8

3、超过滤法8

4、冷冻干燥法。8

1、化学吸水剂法8

（三）、蛋白溶液的浓缩8

（四）、蛋白浓度的定量方法9

1、紫外吸收法9

2、考马斯亮兰G—250定量法9

3、改良Loawry（Folin酚法）法。9

二、层析技术14

（一）、各种凝胶层析15

（二）、离子交换纤维素层析30

（三）、抗原—抗体特异亲合层析45

1、活化琼脂糖珠亲合层析（Sepharose4B）45

2、生物凝胶珠免疫吸附剂的制备（Bio—Gelp—300）49

3、葡聚糖凝胶珠免疫吸附剂的制备（SophadexG—200）53

（四）、特异吸附层析56

1、ConA—Sepharose4B的亲合层析57

2、Blue—DextranSepharoseCL—6B层析（人β干扰素的纯化＊）60

3、磁性胶等特异亲合层析吸附剂＊63

三、电泳技术63

（一）、免疫电泳63

1、微量免疫电泳63

2、对流免疫电泳63

3、火箭免疫电泳63

4、免疫火箭扩散电泳（Immunol—Rocket—diffisonElectrophoresisIRDE）＊63

3、盘状等电点聚胶电泳（PAG—IFE）76

6、PAGE蛋白的银染色法＊。76

5、垂直板状SDS—PAGE（单一浓度胶、梯度胶法）＊76

4、同工酶的PAGE及IFE76

2、盘状SDS—PAGE76

1、盘状PAGE76

（二）、聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）76

（三）、其它电泳技术105

1、醋酸纤维素膜电泳105

2、薄层琼脂糖凝胶聚焦电泳105

四、标记技术109

（一）、荧光素标记抗体法109

1、异硫氰酸荧光素（FITC）的直109

接、间接标记法109

2、异硫氰酸四甲基罗丹明（TMRITC）标记法109

3、四乙基罗丹明（RB200）标记法。109

5、免疫荧光定量染色法121

4、细胞表抗原免疫荧光染色法121

7、酶作用底物产生荧光法121

8、自身身抗体免疫荧光染色法＊。121

6、荧光激活细胞分离法121

2、间接法121

1、直接法121

（二）、免疫荧光染色法121

3、抗补体染色法121

（三）、酶标记抗体技术133

1、辣根过氧化物酶（HRP）标记抗体法133

（1）、过碘酸钠氧化标记法133

（2）、改良过碘酸钠标记法，＊133

（3）、戊二醛二步标记法＊。133

2、酶—抗酶复合物（PAP）的制备＊133

3、免疫酶染色法及酶联免疫吸附试验（ELISA）133

3、亲合素145

4、亲合素—生物素系统的染色技术：BA、BAB、ABC、ABC—ELISA及ABC—dot—ELISA。145

（A）分子的HRP或FITC标记145

（B）分子的活化145

2、生物素与大分子的连接145

1、生物素145

（四）、亲合素（Aridin）—生物素（Biotin）标记技术＊145

（五）、同位素标记抗体法152

（六）、化学发光免疫标记法156

五、免疫扩散技术160

（一）、双向免疫扩散160

（二）、单向免疫扩散163

（三）、逆向免疫扩散165

3、人IgG、IgA及IgM的连续分离法169

4、人IgA的亲合层析分离制备169

5、分泌IgA（SIgA）的分离法169

2、兔血清IgG的简便快速纯化法169

6、IgE的分离纯化169

7、IgD的分离纯化169

8、人IgG亚类的分离纯化169

9、小鼠血清IgG亚类的分离纯化169

（2）、硫酸钠盐析纯化人IgG169

（5）、人、兔、羊、马及狗血清IgG的盐析—离子交换层析169

（4）、辛酸及Rivan？l盐析分离人IgG、IgA及IgM169

（3）、硫酸铵盐析各种动物血清IgG及小鼠IgG的纯化＊。169

（1）、硫酸铵盐析人血清中的？、β及γ球蛋白169

1、盐析法分离纯化Ig169

（一）、血清免疫球蛋白（Ig）的分离纯化169

六、血浆蛋白的纯化与鉴定169

5、Fd？的制备193

4、IgA的F（ab）？Fab？Fc？片段的制备193

3、IgM的Fabμ及Fcμ片段的制备193

2、木瓜蛋白酶水解IgG制备Fab及FC片段193

1、胃蛋白水解IgG制备F（ab）2′及Fc′片段193

（三）、Ig多肽链碎片的制备193

4、SIgA的分泌成分（SC）的制备193

3、人IgA的？链、J链的制备193

2、人IgMμ链的制备193

1、人IgG的γ重链、K或λ轻链的制备193

（二）、Ig多肽链的分离纯化193

（四）、血浆Ig等蛋白的分析与鉴定207

七、抗血清的制备技术＊209

（一）、免疫原的制备209

（二）、动物免疫209

（三）、试血及效价测定210

（四）、免疫动物血液采集及血清分离211

（五）、抗血清的鉴定及分装保存211