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前言1

第一章抗原抗体反应总论1

第一节 抗原抗体的一般特点1

一、抗原的特点和种类1

二、抗原的决定基和结合价2

三、抗原的理化性状及特异性基础4

四、抗体的基本结构和种类5

五、抗体结合价的物理化学性状8

六、抗体的亲和力和活动性9

一、抗原抗体的胶体特性及极化基吸附作用10

第二节 抗原与抗体结合的机理10

二、抗原与抗体结合的力学性质12

第三节 抗原抗体反应的形式14

一、单纯的抗原抗体反应14

二、抗抗体或双抗体反应15

第四节 抗原抗体反应特点16

第五节 影响抗原抗体结合的因素17

第二章蛋白质的盐析技术18

第一节 蛋白质的几个性质18

一、蛋白质的两性游离及等电点18

二、蛋白质的胶体性质19

一、中性盐类20

三、蛋白质的沉淀作用20

第二节 影响中性盐分离和提纯蛋白质的几个因素20

二、离子强度21

三、溶液的pH值23

四、蛋白质的浓度23

五、温度23

第三节 利用中性盐分离血浆的主要成分23

第四节 去盐及浓缩25

一、去盐26

二、蛋白质的浓缩方法26

第一节 凝胶的性质和应用原理28

第三章凝胶过滤28

第二节 洗脱特性30

第三节 几种常用凝胶的使用32

一、葡聚糖凝胶32

二、亲脂性葡聚糖凝胶37

三、聚丙烯酰胺凝胶37

四、琼脂糖凝胶38

第四节 凝胶过滤在免疫学上的应用38

一、制备上的应用38

二、分析上的应用41

第一节 离子交换原理42

第四章离子交换层析法42

第二节 离子交换剂种类和性质44

一、离子交换纤维素44

二、离子交换葡聚糖凝胶45

第三节 初试条件的选择46

一、离子交换剂的选择46

二、粒度大小的选择47

三、缓冲液的选择47

第四节 操作步骤47

一、离子交换纤维素的处理47

二、加样48

二、装柱48

四、洗脱49

五、洗脱液的检查分析50

第五章亲和层析技术52

第一节 亲和层析的基本原理53

第二节 几种类型的免疫吸附剂及其应用方法53

一、使抗原或抗体吸附在某些固体支持物的表面上53

二、网络法53

三、共价键结合法54

四、戊二醛偶联吸附柱的制备法57

一、琼脂糖珠(Sepharose 4B)制备法58

第三节 亲和层析在免疫学中的应用58

第四节 Sepharose 4B和CNBr的制备法58

二、溴化氰(CNBr)的合成法59

第六章免疫球蛋白的纯化和测定61

第一节 免疫球蛋白的分离61

一、IgG的纯化方法61

二、IgM的纯化方法63

三、IgA的纯化方法63

四、IgD的分离和纯化64

五、IgE的分离和纯化65

二、圆盘电泳法67

三、免疫电泳法67

第二节 免疫球蛋白的纯度的鉴定67

一、双向扩散法67

第三节 抗免疫球蛋白免疫血清的制备68

一、单价免疫血清的制备68

二、动物放血法69

三、抗血清的鉴定和处理69

第四节 免疫球蛋白的实际测定70

一、免疫单扩散免疫球蛋白定量法70

一、免疫球蛋白增殖病72

第五节 免疫球蛋白测定在临床上的应用72

二、火箭免疫电泳法免疫球蛋白定量(见第七章)72

二、免疫缺陷病76

附：正常血浆蛋白成分特征表77

第七章免疫扩散和免疫电泳方法79

第一节 琼脂免疫扩散法79

一、试验材料80

二、试验方法80

三、影响因素83

一、什么是电泳和电泳技术84

二、电泳技术的基本原理84

第二节 区带电泳技术84

三、区带电泳简要介绍87

第三节 对流免疫电泳技术88

一、对流电泳的基本原理89

二、操作方法91

三、有关几个问题91

第四节 琼脂免疫电泳技术92

一、免疫电泳的简单原理92

二、材料和试剂93

三、操作方法95

四、琼脂干燥薄膜的作法95

1.免疫电泳常见的沉淀线96

五、免疫电泳结果分析96

2.正常人血浆蛋白免疫电泳分析97

3.异常人血浆蛋白免疫电泳分析100

4.免疫电泳综合分析104

第五节 火箭免疫电泳106

一、材料106

二、方法106

三、几点注意107

四、火箭电泳的改良方法(IgC火箭电泳)107

二、方法108

一、材料108

第六节 交叉免疫电泳108

三、应用109

四、鉴定和计算110

第七节 纵列交叉比较免疫电泳110

第八节 圆盘电泳111

一、原理111

二、器材111

三、圆盘电泳的简化操作方法112

四、几种原料的纯化和制备113

五、圆盘电泳的应用113

第九节 等电聚焦电泳114

二、仪器和设备115

三、凝胶板的制备115

四、电泳115

一、材料115

五、固定染色116

六、pH的测定及PI的确定116

第十节 粉末电泳(淀粉块电泳)116

附表：人血浆蛋白免疫电泳组分说明118

第八章补体技术123

第一节 补体的化学性质123

二、方法125

第二节 补体结合试验125

一、材料125

第三节 免疫粘连血凝试验128

一、试剂128

二、试验方法129

第四节 溶血空斑试验130

第五节 总补体活性测定(CH50测定)131

一、试剂131

二、试验方法131

三、计算132

二、人C3的提取和测定方法133

第六节 单个补体成分的纯化方法133

一、人C1q纯化方法(见自身免疫病，免疫复合物节)133

三、人C4成分的提取和测定方法136

四、C2的提取和纯化方法138

第七节 补体测定的临床意义140

第九章间接血凝试验143

一、基本原理143

二、试剂的制备145

三、致敏方法和实际试验146

四、影响鞣酸化血球的因素147

五、间接血凝的临床应用149

一、直接萤光抗体法151

第十章免疫萤光技术151

第一节 免疫萤光的原理和方法151

二、间接萤光抗体法152

三、补体萤光抗体法153

第二节 萤光显微镜术153

一、萤光现象155

二、萤光素类155

三、萤光显微镜使用的一些问题157

第三节 萤光标记抗体的制备157

二、免疫方法158

三、抗体的提纯158

一、抗原的制备158

四、抗体的标记159

五、标记抗体的提纯160

六、标记抗体的鉴定161

第四节 免疫萤光的应用162

一、在细菌学上的应用162

二、在寄生虫学中的应用162

三、在病毒学上的应用162

四、在免疫病理方面的应用162

五、在自身免疫病中的应用162

二、双抗体法或者架桥法(Bridge)165

三、竞争性抑制法165

第一节 ELISA的应用原理165

一、间接法165

第十一章酶连免疫吸附技术(ELISA)165

第二节 酶纯化的方法和活性测定167

一、辣根过氧化物酶的纯化方法167

二、辣根过氧化物酶的纯度和活性测定167

第三节 酶标记抗体的制备法167

一、戊二醛一步法168

二、戊二醛二步法168

三、过碘酸钠结合法168

二、双抗体法查肾组织的沉淀抗体169

第四节 酶连免疫吸附测定方法169

一、间接过氧化酶标记法查抗核抗体169

三、固相免疫酶测定法170

第五节 ELISA的临床应用172

第十二章放射免疫技术173

第一节 放射免疫的基本原理173

第二节 抗原的同位素标记174

第三节 放射免疫测定法176

一、抗血清稀释度的选择177

二、分离技术的选择177

三、标准竞争抑制曲线178

第四节 免疫沉淀放射自显影179

四、血清样品的测定179

第五节 放射免疫的临床应用180

一、AFP放射免疫测定181

二、绒毛膜促性腺激素的放射免疫测定182

三、甲状腺激素的放射免疫测定182

四、促甲状腺素的放射免疫测定183

五、毛地黄的放射免疫的测定183

六、其他应用183

第十三章细胞免疫技术185

一、皮肤试验186

第一节 体内淋巴细胞功能试验186

二、其他方法187

第二节 淋巴细胞分离方法和活性测定188

一、直接沉降法188

二，比重分层法188

三、淋巴细胞活力试验189

第三节 玫瑰花形成试验190

一、E-玫瑰花形成试验(T细胞)190

二、微量全血测定E-玫瑰花方法(T细胞)191

三、活性E-玫瑰花形成试验(T细胞)191

四、EAC玫瑰花形成试验(B细胞)193

七、稳定玫瑰花形成试验(T细胞)194

五、FBC花环形成试验(B细胞)194

六、混合玫瑰花形成试验194

八、B淋巴细胞表面膜免疫球蛋白萤光标记195

九、鼠玫瑰花形成试验(B细胞)195

第四节 淋巴细胞转化试验196

一、形态学方法196

二、全血培养法197

三、培养法197

四、3H同位素掺入转化法197

附：PHA提取法197

一、各种细胞的制备199

第五节 巨噬细胞移动抑制试验199

三、琼脂糖平皿打孔法200

四、琼脂糖悬滴培养法(Hairng Ton改良法)200

二、毛细管测定法200

第六节 巨噬细胞电泳201

第七节 白细胞粘附抑制试验202

第八节 巨噬细胞吞噬功能测定法204

第九节 NBT(硝基四氮唑兰)试验205

第十节 间接嗜碱性细胞脱颗粒试验206

第十四章自身免疫病免疫检查方法和临床价值208

第一节 概论208

一、类风湿因子乳胶凝集试验211

第二节 类风湿因子211

二、致敏羊血球凝集试验(Waaler-Rose)试验212

三、致敏乳胶凝集试验213

第三节 抗核抗体的检测方法215

一、肝片间接免疫萤光检测抗核抗体215

二、人末梢血片萤光抗体法检测抗核抗体218

三、DNA斑片试验219

四、DNA间接血凝试验220

第四节 抗平滑肌抗体和抗线粒体抗体的荧光抗体检查法222

二、琼脂双向扩散法测定抗甲状腺抗体224

第五节 抗甲状腺球蛋白抗体的检测224

一、甲状腺球蛋白的制备224

三、间接血凝试验测定抗甲状腺球蛋白抗体225

四、萤光抗体法检查抗甲状腺抗体226

第六节 抗心肌抗体的检测227

第七节 抗胃壁细胞抗体的检查228

第八节 自身抗体免疫萤光联合筛选法229

第十五章体液中免疫复合物检测方法232

第一节 Clq凝胶扩散法和Clq放射免疫法测定免疫复合物233

一、DNA沉淀法提取Clq233

二、螯合沉淀法提取Clq234

三、Clq沉淀免疫复合物操作方法(琼脂扩散法)235

四、Clq放射免疫标记测定免疫复合物方法235

第二节 mRF凝胶扩散法测定免疫复合物236

第三节 固相胶固素结合法测定免疫复合物237

一、牛胶固素的提取法237

二、固相放射免疫测定免疫复合物238

第四节 抗补体测定(微量法)检测免疫复合物238

第五节 聚乙二醇沉淀法测定免疫复合物240

第六节 活检组织中免疫复合物萤光抗体检查241

第七节 免疫复合物检测的临床意义242

第一节 免疫血液病的基本概念244

第十六章免疫血液病的发生机理和检验诊断概要244

第二节 红血球系免疫病发生机理和检查245

一、自身免疫性溶血性贫血245

二、药物过敏性溶血性贫血248

三、恶性贫血250

四、输血反应253

第三节 白细胞系免疫病的发生机理和检查256

一、免疫性中性粒细胞减少症256

二、白细胞的输血反应260

三、嗜酸性白细胞增多症260

一、血小板功能及血小板免疫病种类261

第四节 血小板系免疫病的发生机理和检查261

二、特发性血小板减少性紫癜262

三、药物过敏性血小板减少性紫癜266

四、输血后紫癜及同种免疫新生儿血小板减少症268

第五节 血浆异型蛋白所致的免疫反应269

一、输血中血浆蛋白的过敏反应269

二、免疫性抗凝因子所致的血凝障碍270

第十七章移植免疫实验室检查技术273

一、微量淋巴细胞毒配型技术273

二、血小板补体结合微量试验275

三、混合淋巴细胞培养方法(微量法)276

四、交叉配合试验279

五、淋巴细胞转化(四小时氚标测定)281

六、玫瑰花形成试验和玫瑰花形成抑制试验282

七、白细胞移动抑制试验283

八、淋巴细胞简单冰凉保存法284

第十八章乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的纯化与反相血凝测定法285

第一节 HBsAg的纯化285

一、盐析与加热变性法纯化HBsAg285

二、Rivanol(利凡诺)合并(NH4)2SO4纯化HBsAg285

三、有机溶剂沉淀法纯化HBsAg286

六、亲和层析法纯化HBsAg287

五、抗原抗体复合物及凝胶过滤法纯化HBsAg287

四、聚乙二醇-胃蛋白酶-Tween80纯化HBsAg287

第二节 反相被动血凝检测乙型肝炎表面抗原289

第三节 乙型肝炎免疫研究和临床价值291

一、乙型肝炎和体液免疫291

二、乙型肝炎和细胞免疫293

三、E抗原和E抗体293

第十九章免疫学诊断在临床上的应用295

第一节 免疫学诊断的含义和范围295

一、免疫学诊断的方法学295

二、三级功能试验296

三、细胞免疫的测定297

二、体液免疫的测定297

第二节 免疫学诊断的临床应用297

一、非特异性免疫功能试验297

四、变态反应疾患的免疫学诊断298

五、自身免疫病的免疫学检查299

六、传染病的免疫学诊断300

七、肿瘤的免疫学诊断300

第三节 结语301

第二十章抗血清的制备方法302

一、动物的选择302

二、免疫原302

四、免疫和采血方法303

三、佐剂的使用303

五、抗血清效价测定和浓缩方法306

六、抗血清的保存307

附录一 免疫学技术常用试剂的配制308

附录二 相对离心力(G)换算尺328

附录三 希腊字母表329

附录四 常量、微量、超微量度、量、衡单位名称表330

附录五 常用免疫学术语解释332

主要参考文献361

编后记367