《免疫荧光技术》

第一章免疫荧光的原理及特点1

第二章荧光抗体的制备3

第一节免疫血清的制备3

一、抗原3

二、动物3

三、免疫途径4

四、佐剂4

五、抗原剂量5

六、多次注射的间隔时间5

七、免疫血清的效价6

八、自然感染病例抗血清的利用7

第二节免疫球蛋白的提取7

一、硫酸铵盐析法7

二、离子交换层析技术9

三、凝胶过滤12

四、简易快速提取法13

第三节脱盐14

一、透析法14

二、葡聚糖凝胶过滤法14

第四节定氮及浓缩17

一、双缩脲法17

二、福林—酚法19

三、紫外光谱吸收法20

四、凯氏微量定氮法21

五、蛋白液的浓缩21

第五节荧光色素的标记21

一、适于蛋白标记的荧光色素22

二、标记方法23

三、影响标记的因素24

第六节标记抗体的提纯24

一、去除游离荧光色素25

二、去除过度标记的蛋白分子26

三、去除特异交又或额外反应性标记抗体27

第七节标记抗体的鉴定28

一、F/P比值的测定28

二、免疫电泳29

三、染色性能鉴定31

第八节关于非特异性荧光染色问题33

一、非特异性荧光染色的原因33

二、非特异性荧光染色因素的去除34

第三章标本的制备方法36

一、材料的收集36

二、显微镜标本片的制备36

三、标本的固定37

四、标本片的保存39

第四章荧光抗体染色法40

第一节 荧光抗体染色的基本条件40

第二节荧光抗体染色法40

一、直接法40

二、间接法41

三、特殊染色法43

四、染色标本的保存43

第五章荧光显微镜检查44

第一节 光源44

第二节滤片系统45

一、激发滤板46

二、压制滤板46

第三节显微镜47

一、聚光器47

二、反光镜48

三、落射光装置48

四、物镜48

五、目镜49

六、载玻片及盖玻片49

七、镜油49

第四节 荧光显微镜的使用49

第五节 荧光抗体镜检结果记录法50

第六节 荧光显微摄影木50

附：实验中常用溶液的配制法51