《荧光和免疫荧光染色技术及应用 第2版》求取 ⇩

第一章 光、荧光和荧光色素1

一、光和发光1

二、荧光1

三、荧光色素4

(一)荧光染色液的pH值5

(二)荧光染色液的浓度6

(三)荧光染色液的温度7

第二章 荧光显微镜9

一、光源10

二、滤片系统11

(一)Reichert荧光显微镜中的各型滤片11

(二)Nibon荧光显微镜中的各型滤片14

三、显微镜17

第三章 动物组织的自发性荧光和续发性荧光21

一、组织细胞的自发性荧光21

(一)显示肾上腺髓质细胞中去甲肾上腺素的荧光方法23

(二)显示神经纤维和肥大细胞中单胺成分的荧光方法23

(三)显示肾上腺素能神经纤维的改良法24

(四)显示脑干单胺神经元或消化道粘膜内分泌细胞的荧光方法24

二、组织细胞的续发性荧光25

(一)吖啶橙(简称AO)活细胞荧光染色法25

1.培养细胞AO荧光染色法25

2.末梢血细胞AO荧光染色法26

3.肥大细胞AO荧光染色法27

4.精子AO荧光染色法27

5.各种寄生虫和虫卵AO荧光染色法27

(二)7690-Xu活细胞荧光染色法29

1.淋巴细胞7690-Xu荧光染色法29

2.巨噬细胞7690-Xu荧光染色法34

3.尿液中癌细胞7690-Xu荧光染色法36

4.骨髓穿刺液骨髓瘤细胞7690-Xu荧光染色法37

5.胸腹水癌细胞7690-Xu荧光染色法38

(三)固定细胞荧光染色法38

1.显示细胞内DNA和RNA的AO荧光染色法38

2.检测疟原虫血涂片AO荧光染色法40

3.改进的AO荧光快速染色法41

4.显示细胞核DNA荧光Feulgen反应法44

5.显示粘蛋白的荧光PAS反应法45

6.显示酸性粘多糖的荧光染色法46

7.显示淀粉样物质(amyloid)荧光染色法46

8.显示类脂质的磷化氢3R荧光染色法47

9.显示类脂质的3，4-苯并芘(3，4-benzopyrene)荧光染色法47

10.同时显示两种核酸和类脂质的荧光染色法48

11.显示Y染色体的荧光染色法48

12.显示姊妹染色单体的荧光染色法49

13.荧光氨诱发细胞内一级氨基方法51

14.显示钙和铝的荧光染色法51

(四)病原微生物的荧光染色法52

1.抗酸杆菌金胺-罗达明荧光染色法52

2.抗酸杆菌金胺荧光染色法53

3.白喉杆菌荧光染色法53

4.球菌荧光染色法54

5.螺旋体荧光染色法54

6.立克次体荧光染色法54

第四章 免疫荧光技术56

一、荧光抗体染色方法的基本原理56

(一)直接法57

(二)间接法57

1.抗原间接显示法(双层法)57

2.细胞内抗体间接显示法(夹层法)58

(三)补体法58

二、荧光抗体的制备和染色方法59

(一)抗原(免疫原)59

(二)制备免疫血清60

1.制备高效价免疫血清的条件60

2.制备免疫血清的方法61

(三)提取免疫球蛋白62

(四)制备荧光抗体64

1.荧光色素64

2.标记方法64

3.标记抗体的提纯66

(五)荧光抗体染色方法72

1.直接染色法72

2.间接染色法72

3.补体染色法73

4.双重染色法73

(六)染色标本的保存和封片介质的制备74

1.染色标本的保存74

2.封片介质的制备74

三、免疫荧光技术在医学中的应用74

(一)荧光抗体染色方法在组织细胞学研究方面的应用74

1.激素和酶的定位74

2.组织和细胞内抗原性物质的示踪75

3.细胞膜抗原和膜受体的观察77

4.有关免疫细胞学研究79

(二)荧光抗体染色方法在细菌学和病毒学中的应用80

(三)荧光抗体染色方法在自身免疫病研究与诊断中的应用82

1.肾脏疾病84

2.肝脏疾病85

3.重症肌无力85

4.系统性红斑狼疮86

5.类风湿性关节炎87

6.各种皮肤病87

(四)荧光抗体染色方法在寄生虫学中的应用88

1.阿米巴病90

2.锥虫病90

3.疟疾91

4.弓浆虫病92

5.丝虫病92

6.旋毛虫病93

7.血吸虫病93

8.棘球蚴病94

9.其他原虫病95

10.其他蠕虫病97

第五章 荧光和免疫荧光染色在流式细胞术中的应用101

一、流式细胞仪的基本结构和主要原理101

(一)基本结构101

(二)主要原理102

二、光信号及意义103

(一)前向散射光103

(二)侧向散射光103

(三)荧光讯号103

三、数据显示及分析104

(一)直方图104

(二)二维点图104

(三)三维图105

四、流式细胞术可测量的主要参数106

(一)结构性参数106

(二)功能性参数106

五、样本准备106

(一)单细胞悬液制备107

1.脱落细胞等标本107

2.单层培养细胞标本107

3.实体组织标本108

4.石蜡包埋标本109

(二)染色方法109

1.溴化乙啶或碘化丙啶荧光染色法110

2.哌若宁Y荧光染色法110

3.吖啶橙荧光染色法111

4.异硫氰酸荧光素免疫荧光染色法112

六、流式细胞术的主要应用112

(一)细胞周期和DNA倍体分析112

(二)染色体分析115

(三)细胞表面标志的检测115

(四)细胞分选116

第六章 荧光显微摄影方法118

一、自动摄影装置的组成部件118

(一)目镜取景器118

(二)聚焦望远镜119

(三)自动摄影装置的快门箱和曝光表120

(四)自动摄影装置暗盒120

(五)自动摄影装置的控制箱120

二、显微摄影方法和步骤122

(一)自动曝光方法122

(二)手控曝光方法123

三、显微摄影过程中易发生的问题和纠正方法124

(一)影像模糊124

(二)影像亮度不均匀124

(三)影像明暗反差小124

(四)影像画面中出现阴影125

(五)影像色调失真125

四、常用黑白和彩色正负片及彩色相纸冲洗过程和配方125

(一)冲洗印放黑白片常用配方126

(二)冲洗印放彩色片常用配方和冲洗过程127

五、冲洗彩色正负片和彩色相纸时的注意事项135

参考文献137