《荧光抗体技术及其在兽医上的应用》

简史1

原理2

优点4

荧光抗体技术的应用5

在细菌及病毒方面的应用方式9

荧光抗体技术在生产实践中的意义10

〔附一〕IgM11

〔附二〕IgG11

〔附三〕IgA12

第一章　特异性抗血清的制备13

一、不同试验动物的免疫程序13

二、不同抗原的抗血清生产15

三、免疫吸附剂20

〔附〕脂蛋白苏丹黑染色法21

一、硫酸铵法（Kendall氏法）23

第二章　球蛋白的分离、提纯和效价测定23

二、冷乙醇法（Nichol及Deutsch氏法）27

三、Ethodin法（Gordon等及Horejsis Smetana氏法）28

四、抗体球蛋白的提纯28

五、球蛋白在和荧光性色素结合前的测定30

（一）蛋白质含量的测定（球蛋白的定量测定）30

（二）球蛋白纯度的测定34

（三）抗体球蛋白的抗体效价测定36

第三章　荧光标记剂和抗体的标记39

一、荧光标记剂39

二、抗体的标记43

（一）用FITC标记44

（二）用异硫氰酸四甲基若丹明标记51

（三）用RB200SC标记（Chadwick氏法）51

（四）用DANSC标记（Mayersbach氏法）52

三、荧光性的对比染色剂53

第四章　荧光抗体的精制、滴定、浓缩及保存54

一、排除未结合色素及其降解物54

（一）透析法54

（二）凝胶滤过法55

（三）应用DEAE-葡聚糖G25层析法57

（四）活性炭提出法59

二、DEAE-纤维素柱层析法59

三、吸收60

四、稀薄蛋白质溶液的浓缩62

五、荧光抗体的测定及评价63

六、荧光抗体的保存67

第五章　载片的准备和标本的固定68

一、载片的准备68

二、荧光抗体染色标本的制作69

三、标本的固定方法71

四、染色用的标本的保存75

〔附一〕粪便标本的制备76

〔附二〕水样标本的制备76

第六章　免疫荧光染色法77

一、用已知抗体染抗原77

（一）直接法77

（二）抗球蛋白法81

（三）抗补体法84

（四）双重染色法86

二、染色定位的抗体86

（一）直接法86

（二）间接法87

三、血清中抗体的鉴定88

（一）抗球蛋白法88

（二）抑制法89

（四）溶解性抗原法90

（三）抗补体法90

四、封裱剂91

五、染色标本的保存92

第七章　荧光显微镜的使用93

一、荧光显微镜装置93

二、观察方法100

三、摄影102

第八章　关于非特异性染色问题104

一、自发荧光104

二、来自荧光血清的非特异性染色105

三、来自正常血清及免疫血清的非特异性染色107

四、来自荧光抗体技术的非特异性染色109

五、消除非特异性染色的方法110

一、链球菌的荧光抗体技术检验112

第九章　荧光抗体技术在兽医细菌性疾病诊断上的应用112

二、炭疽病的荧光抗体检验113

三、猪丹毒的间接免疫荧光检验114

四、李氏杆菌病的荧光抗体检验114

五、野兔病的荧光抗体检验115

六、Tyzzer氏病病原体——毛样杆菌（B.piliformis）的荧光抗体检验115

七、应用荧光抗体区别腐败梭菌与气肿疽（黑腿病）梭菌116

八、用荧光抗体法检查腐败梭菌117

九、免疫荧光检验食物中的肉毒梭菌E型所产生的毒素118

十、破伤风的荧光抗体检验119

十一、应用免疫荧光技术检验猪组织中的沙门氏杆菌120

十二、布氏杆菌病的荧光抗体检验121

十三、用荧光抗体检验精液及包皮渗出物中的胎儿弧菌122

十四、荧光抗体技术鉴定坏死杆菌（Sphaerophorus necrophorus）123

十六、钩端螺旋体的荧光抗体检验124

十五、结核病的间接荧光抗体法检验124

十七、用间接荧光抗体法检查新型隐球菌127

第十章　荧光抗体技术在兽医枝原体及病毒性疾病诊断上的应用128

一、猪枝原体肺炎的荧光抗体检验128

二、鹦鹉病的荧光抗体检验130

三、狂犬病涂片的荧光抗体染色及检验130

四、假狂犬病的荧光抗体检验132

五、猪SMEDI（Entero）病毒的荧光抗体检验133

六、猪瘟的荧光抗体检验133

七、马传染性贫血的荧光抗体检验137

八、德兴（Teschen）病病毒的免疫荧光检验139

九、口蹄疫的荧光抗体检验139

十、牛传染性鼻气管炎的荧光抗体检验140

十一、荧光抗体直接法诊断鸡脑脊髓炎（AE）140

十二、鸡的其他几种病毒性感染的荧光抗体检验141

十三、免疫荧光技术检验猫白血病及肌瘤病毒的抗原和抗体142

十四、用间接荧光抗体法检验猫纤维肉瘤病毒143

十五、猪传染性水泡病病毒的荧光抗体检验143

第十一章　荧光抗体技术在兽医寄生虫病诊断上的应用147

一、荧光抗体研究禽球虫的抗原147

二、用间接荧光抗体法研究牛的泰氏焦虫感染147

三、荧光抗体法检验扁虱体内的焦虫148

四、免疫荧光法诊断牛囊包虫病的抗原的制备与选择148

五、应用可溶性抗原荧光抗体法检验犬心丝虫149

六、用间接荧光抗体法检验牛羊血吸虫病151

附录152

一、碳酸盐缓冲剂，pH9.5,0.5M152

二、磷酸盐缓冲剂，pH6.3,0.0175M152

三、食盐溶液（供DEAE色层析法用）152

四、硫柳汞的配制152

五、5％酚甘油的配制152