《免疫学实验技术讲义》求取 ⇩

一、基本原理1

第一部分 免疫电泳技术1

二、琼脂免疫电泳4

(一)实验方法4

(二)结果判定7

(三)注意事项13

(四)附录15

三、醋酸纤维薄膜电泳与免疫电泳15

(一)实验方法16

〔附〕醋酸纤维薄膜的制备法18

(二)结果判定18

(三)注意事项18

四、聚丙烯酰胺凝胶电泳与免疫电泳19

(一)实验方法21

(二)结果判定23

(三)注意事项24

〔附〕实验用各种试剂配制25

五、对流免疫电泳26

(一)实验方法26

(二)结果判定27

六、单向琼脂免疫电泳(火箭电泳)28

(一)实验方法28

(三)注意事项28

(二)结果判定30

(三)标准曲线制定30

(四)注意事项30

七、应用举例--乙型肝炎表面抗原的检测31

一、免疫球蛋白的提纯40

(一)血清IgG的提纯40

第二部分 免疫球蛋白测定40

(二)初乳中分泌型IgA的提纯47

二、免疫球蛋白的纯度鉴定51

(一)琼脂单纯(区带)电泳52

(二)琼脂双向扩散54

(三)琼脂免疫电泳56

(四)聚丙烯酰胺凝胶电泳(园盘电泳)58

三、免疫球蛋白定量测定--单向琼脂扩散法59

(一)标准曲线的制定60

(二)待检标本的测定67

〔附〕以未标定抗血清制定标准曲线68

(三)痰中IgA的定量测定69

(四)注意事项70

第三部分 其他体液免疫检测法73

？球凝集试验--检测脑膜炎球菌抗体73

(一)材料74

(二)试验方法77

(三)结果判定标准78

(四)注意事项78

〔附〕培养基和试剂80

(一)基本原理82

二、反向血球凝集试验82

(二)抗体致敏红细胞的制备84

(三)试验方法和结果判定91

(四)应用举例--检测脑膜炎球菌抗原94

〔附〕常用溶液的配制95

三、乳胶凝集试验--检测钩端螺旋体抗体101

(一)聚苯乙烯胶乳的合成102

(二)钩端螺旋体致敏原的制备103

(三)胶乳的胰蛋白酶处理103

(五)胶乳抗原的鉴定104

(六)试验方法104

(四)胶乳的致敏104

〔附〕钩体乳凝试验应用情况简介106

四、免疫粘附血凝试验--检测乙型肝炎抗原107

(一)基本原理108

(二)材料与方法109

(三)影响因素及注意事项113

〔附〕IAHA的试剂和方法(DTT法)116

五、细菌玻板凝集试验118

(一)器材和试剂119

(二)操作方法120

(三)玻板凝集抗原的制备原则及其滴定122

六、微量补体结合试验125

(一)材料126

(二)方法126

(三)注意事项131

七、人血清总补体量的测定133

(一)材料133

(二)试验方法134

(三)注意事项135

八、微量滴定法135

(一)基本器材及其使用方法136

(二)一般操作步骤148

(三)实验结果及应用范围154

第四部分 细胞免疫检测法163

一、玫瑰花瓣形成试验163

(一)常量E-玫瑰花瓣形成试验163

(二)微量E-玫瑰花瓣形成试验168

(三)早期玫瑰花瓣形成试验170

(四)EAC-玫瑰花瓣形成试验172

(五)E和EAC玫瑰花瓣联合试验173

二、淋巴细胞转化试验175

(一)材料176

(二)试验方法177

(三)结果判定179

(四)注意事项181

〔附〕微量淋巴细胞转化试验184

三、巨噬细胞移动抑制试验185

(一)毛细管法(一步法)186

(二)平皿法188

四、巨噬细胞吞噬试验(皮泡法)189

(一)材料190

(二)试验方法191

(三)结果判定192

(四)注意事项193

〔附一〕细胞毒性试验(微量法)193

〔附二〕各种细胞免疫检测法的比较194

〔附三〕间接嗜硷细胞脱颗粒试验195

第五部分 免疫荧光技术198

一、免疫荧光技术的原理198

(一)直接法198

(二)间接法199

(一)免疫血清制备方法200

二、免疫血清的制备200

(三)补体法200

(二)效价测定方法204

三、荧光抗体的制备204

(一)荧光色素204

(二)标记方法205

(三)荧光抗体的鉴定209

(四)荧光抗体的保存211

四、荧光抗体染色法211

(一)标本制作211

(二)荧光抗体染色法211

(三)荧光显微镜检查法215

五、自身抗体的免疫荧光检查法218

(一)抗核抗体(或抗核因子)219

(二)平滑肌自身抗体222

(三)线粒体抗体223

(四)甲状腺球蛋白抗体224

(五)甲状腺微粒体抗体225

(六)抗心肌抗体225

六、非特异性染色的消除法227

(一)非特异性染色的主要因素227

(二)消除非特异性染色的方法228

〔附〕过氧化物酶标记抗体技术233

第六部分 放射免疫技术242

一、放射免疫饱和分析法242

(一)基本原理243

(二)标记抗原的选用246

(三)抗血清的选择和用量251

(四)分离B、F的方法255

(五)实验举例259

二、放射免疫沉淀自显影法276

(一)基本原理和类型276

(二)实验举例278

第七部分 有关蛋白质分离的技术287

一、中性盐(硫酸铵)分段沉淀免疫球蛋白287

(一)基本原理及其优缺点287

(二)实验条件和方法290

(三)应用举例293

(四)去盐及浓缩294

二、凝胶过滤(凝胶层析)296

(一)基本原理、优点和适用范围296

(二)几种常用层析凝胶的性质301

(三)实验条件的选择305

(四)应用举例314

三、离子交换剂层析316

(一)离子交换剂316

(二)基本原理320

(三)实验条件及其选择327

(四)应用举例343

四、免疫吸附亲和层析346

(一)基本原理348

(二)免疫吸附剂的几种类型349

(三)实验举例--免疫吸附剂亲和层析提纯甲胎蛋白(AFP)358