《实验免疫学》求取 ⇩

一、盐析法1

(一)基本原理1

第一章 免疫球蛋白的分离技术1

(二)材料2

(三)方法2

二、凝胶过滤法3

(一)基本原理3

(二)方法8

(一)基本原理13

(三)应用13

三、离子交换层析法13

(二)方法22

(三)成批制备技术27

(四)制备电泳28

第二章 各类免疫球蛋白的提取与断链技术30

一、血清IgG的提纯30

(一)粗提30

(三)层析法提纯31

(二)低温酒精法提取r-球蛋白(略)31

二、血清IgA的提纯32

(一)材料32

(二)方法32

三、分泌IgA的提纯33

(一)材料33

(二)方法33

(一)材料34

(二)方法34

四、血清IgM的提纯34

(三)血清蛋白分布35

五、血清IgE的提纯36

(一)正常人血清或高IgE血症患者分离IgE36

(二)骨髓瘤病人血清IgE的分离37

六、化学还原法断链技术40

(一)基本原理40

(二)材料41

(三)方法41

(四)评价42

(一)木瓜酶消化法43

七、蛋白分解酶断链技术43

(二)胃酶消化法45

第三章 亲和层析法纯化抗体技术48

一、基本原理48

二、方法49

(一)活化载体49

(二)偶联蛋白49

(三)层析吸附与解吸附纯化蛋白49

〔附一〕Sepharose 4B的制备法52

(一)材料52

(二)方法52

〔附二〕溴化氰合成法53

(一)仪器及药品53

(二)制备方法54

(三)注意事项56

(二)材料58

(一)基本原理58

(三)方法58

第四章 免疫球蛋白基本鉴定技术58

一、单向免疫扩散法58

二、双向扩散法61

(一)材料62

(二)方法62

(三)抗原浓度63

(四)抗血清类型63

(五)结果分析63

(六)抗原浓度半定量试验63

(七)抗原的分子量与扩散系数的鉴定63

(一)基本原理64

三、免疫电泳法64

(二)材料65

(三)方法66

(四)技术分析66

四、单向定量免疫电泳(火箭电泳)72

(一)基本原理72

(二)材料73

(三)方法73

(四)影响因素75

五、醋酸纤维膜电泳75

(一)基本原理75

(三)方法76

(二)材料76

(四)技术分析79

第五章 免疫球蛋白的特殊鉴定技术83

一、聚丙烯酰胺凝胶电泳83

(一)基本原理83

(二)材料89

(三)仪器装置90

(四)试剂的纯化与保存91

(五)方法93

(六)聚丙烯酰胺凝胶免疫电泳95

(七)免疫球蛋白凝胶电泳鉴定96

二、放射免疫自显影法测定IgE97

(一)基本原理97

(二)材料98

(三)方法98

(四)放射免疫电泳99

(五)放射双向扩散100

(六)放射单向扩散100

(二)材料102

(一)原理102

一、免疫板中抗体稀释度的选择102

第六章 免疫球蛋白的定量与标准化技术102

(三)方法103

二、免疫板上抗原稀释度的选择104

三、抗原抗体比例关系的选择104

(一)直线形曲线104

(二)稀释比例105

四、免疫球蛋白水平的标定106

(一)正常血清定量标准化106

(二)免疫球蛋白标准曲线的制订107

五、体液免疫球蛋白正常值110

〔附一〕2-巯基乙醇制备112

〔附二〕碘(代)乙酰胺的制备116

第七章 补体的测定123

一、简介123

二、总补体活性(CH50单位)的测定124

(一)原理124

(二)材料126

(三)方法130

〔附〕本研究室的实验资料137

(一)原理138

三、补体第二途径溶血活性(ACH50单位)的测定138

(二)材料139

(三)方法140

(四)注意事项141

(五)补体第二活化途径与临床的关系141

四、单一补体成分的测定142

(一)人血清补体成分的分离142

(二)人血清补体成分的鉴定154

〔附〕溶血试验平皿法169

(三)补体第三成分的分离和测定173

〔附〕人体中补体第三种成分(C3)的测定法177

第八章 免疫荧光技术198

一、荧光色素及抗血清198

(一)荧光色素198

(二)抗血清201

二、荧光抗体的标记、纯化、鉴定及贮存203

(一)标记方法203

(二)标记抗体的纯化206

(三)标记抗体的鉴定212

(一)组织标本的取材、处理及运送214

三、标本的制作214

(四)荧光抗体的貯存214

(二)组织及细胞标本的制作216

(三)切片及细胞的固定217

(四)组织的选择220

(五)玻片的洁净及处理220

四、染色方法及特异性试验221

(一)染色方法221

(二)染色要点227

(三)特异性试验228

(一)荧光显微镜的基本结构230

五、荧光显微镜及标本观察230

(二)使用要点及标本观察要点239

六、非特异荧光的来源及其去除和荧光抗体标准化242

(一)非特异荧光的来源及其去除242

(二)免疫荧光技术的标准化245

七、免疫荧光定量247

(一)限定抗原底物珠系统(DASS)的制备249

(二)免疫荧光反应250

(三)荧光定量测定250

(一)病原微生物学方面的应用251

八、免疫荧光技术的应用251

(二)免疫学方面的研究252

(三)组织内抗原物质及介质的定位与分布254

(四)肿瘤方面的研究254

(五)淋巴细胞的快速分离255

第九章 免疫酶技术257

一、常用的标记酶257

二、酶标记抗体的制备261

(一)戊二醛标记法及标记抗体的纯化262

(二)过碘酸盐氧化法264

(三)标记抗体定量和克分子比值的计算266

三、可溶性酶-抗酶复合物的制备267

四、免疫酶组化法操作技术269

(一)常规免疫组化法269

(二)特殊染色法272

五、固相酶免疫分析273

(一)酶免疫吸附分析275

(二)限量抗原底物珠体系(DASS体系)280

六、免疫酶技术的应用283

(一)细胞成分的定位284

(二)体液中生物成分的测定284

七、结束语284

第十章 免疫电子显微镜技术286

一、概述286

二、铁蛋白的性质287

三、铁蛋白的制备和纯化288

四、铁蛋白与抗体的偶联方法290

(一)异氰酸酯偶联法290

(二)F.N.P.S偶联法290

(三)戊二醛偶联法291

(四)杂交抗体方法295

五、免疫电镜中的标本处理296

(一)固定296

(二)染色296

六、对照实验297

七、铁蛋白免疫电镜的应用298

八、总结300

一、放射免疫分析概述302

(一)基本原理302

第十一章 放射免疫分析302

(二)材料308

(三)方法318

二、几种放射免疫分析方法326

(一)绒毛膜促性腺激素-黄体生成素(HCG-LH)放射免疫分析326

(二)人血浆胰岛素放射免疫分析334

(三)甲种胎儿蛋白(AFP)放射免疫分析340

(四)癌胚抗原(CEA)放射免疫分析343

第十二章 血清学试验350

一、乳胶凝集试验350

(一)测定类风湿因子的乳胶凝集试验352

(二)测定抗链球菌溶血素“O”乳胶凝集试验355

〔附〕聚苯乙烯乳胶颗粒的制备357

(三)诊断囊虫病的乳胶凝集试验357

(四)诊断钩端螺旋体病的乳胶凝集试验359

(五)反相乳胶凝集试验361

(六)乳胶颗粒凝集抑制试验371

二、抗球蛋白试验374

(一)原理374

(二)试剂378

(三)抗球蛋白试验387

(四)抗补体球蛋白试验389

(五)注意事项391

(六)分析假阳性和假阴性反应出现的原因391

(七)抗球蛋白试验的应用393

三、间接血细胞凝集试验396

(一)原理396

(二)间接血细胞凝集试验399

(三)反向间接红细胞凝集试验412

(四)间接红细胞凝集抑制试验413

(五)注意事项413

(六)应用范围414

四、免疫粘着试验415

(一)基本原理415

(二)材料416

(三)方法419

〔附〕颗粒抗原I-A反应结果判定法421

(四)注意事项422

(五)结果分析423

五、血清免疫复合物的测定425

(一)前言425

(二)测定方法的种类426

(三)Raji细胞放射免疫分析429

第十三章 T细胞与B细胞计数434

一、T细胞计数--E玫瑰花形成试验434

(一)基本原理434

(二)总T玫瑰花试验434

(三)活性T玫瑰花试验438

(四)微量活性T与总T玫瑰花试验439

(五)E玫瑰花试验的实用意义441

二、B细胞检查法441

(一)细胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)的检查(直接免疫荧光法)441

(二)Fc受体的检查(EA玫瑰花试验)444

(三)补体(C-3)受体的检查(EAC玫瑰花试验)447

一、淋巴细胞转化试验451

(一)淋巴细胞培养条件451

第十四章 淋巴细胞功能检查451

(二)淋巴细胞转化的刺激物453

(三)PHA刺激淋巴细胞转化试验方法453

(四)各种淋巴细胞转化检查法的比较458

(五)淋巴细胞转化试验的影响因素458

(一)概述460

(二)白细胞移动抑制试验直接毛细管法460

二、白细胞移动抑制试验(LMIT)460

(三)白细胞移动抑制试验琼脂糖平皿法462

(四)白细胞移动抑制试验琼脂糖微滴法463

(五)白细胞移动抑制试验间接法(二步法)464

(六)方法与结果的评述465

(一)原理466

(二)材料466

三、白细胞粘附抑制试验(LAI)466

(三)LAI试验467

四、抗体、补体引起的细胞毒试验470

(一)淋巴细胞毒试验微量法470

(四)LAI试验两步法470

(三)两种方法的评述472

(四)实用意义472

(二)淋巴细胞毒试验试管法472

五、依赖抗体的淋巴细胞毒(ADCC)试验--K细胞的检查473

(一)空斑形成法测K细胞474

(二)以靶细胞释放51Cr为指标的ADCC试验(检查K细胞)475

(三)用全血检查K细胞477

六、淋巴细胞细胞毒试验479

(一)淋巴细胞毒试验480

(二)用51Cr释放作淋巴细胞细胞毒试验482

(三)淋巴细胞细胞毒试验结果评价483

〔附〕Hanks液配方483

七、体外抗体形成细胞检查法485

(一)简介485

(二)PFC的测定法486

〔附〕Gey氏溶液配制法487

(三)显斑血清的制备498

(四)PFC测定与其他技术的联合应用507

(五)应用509

(六)结束语514

〔附〕T细胞和B细胞对半抗原-载体结合物在抗体产生中的协同作用515

(一)原理523

一、嗜中性粒细胞NBT还原试验523

(二)材料523

第十五章 其他免疫功能检查法523

(三)Park法524

(四)Gifford法525

(五)临床意义526

(一)白细胞的分离527

二、白细胞杀菌功能试验527

(二)细菌悬液制备527

(六)注意事项527

(四)试验方法528

三、巨噬细胞吞噬功能测定528

(三)调理素准备528

(一)材料529

(二)方法529

(三)临床意义530

四、嗜硷细胞及肥大细胞脱颗粒试验531

(一)原理531

(二)直接嗜硷细胞脱颗粒试验532

(三)间接嗜硷细胞脱颗粒试验532

五、过敏性皮肤试验533

(一)速发型皮肤试验533

(四)间接肥大细胞脱颗粒试验533

(二)迟发型皮肤试验535

〔附〕关于用PHA作皮试的方法538

(三)包埋剂927