《表2 本研究使用的InDel分子标记》

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《水稻叶片早衰突变体wss1的性状鉴定及基因定位》

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以粳稻品种02428为母本与突变体wss1杂交，F1自交收种，在海南种植成F2作图群体。选择F2中的突变体表型单株进行基因定位。采用BSA (Bulked Segregant Analysis）法，分别取F2中正常表型植株和突变表型植株各10株的DNA等量混合，构成正常基因池和突变基因池。利用本实验室开发的均匀分布于水稻12条染色体上的240对InDel分子标记，对两个亲本（02428和wss1）进行多态性筛选，用筛选到的多态性标记对两个DNA混池进行多态性分析，寻找与目标基因连锁的标记，部分标记见表2。PCR体系为10μL，包括0.5μL模板DNA、0.4μL 10μmol/L引物、5μL 2×Taq Master Mix和4.1μL ddH2O。PCR程序为94℃预变性3min；94℃30 s，60℃30 s，72℃30 s，35个循环；再72℃延伸10 min。PCR产物经8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，银染显色后，观察记录扩增条带并照相。