《表1 扩增pyr F和pyr G基因的PCR引物》

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《灵芝尿嘧啶营养缺陷型菌株的筛选和分子鉴定》

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用CTAB法[23]提取灵芝尿嘧啶营养缺陷型菌株基因组DNA。根据灵芝pyrF和pyrG基因设计分子标记引物（表1）。PCR反应体系（50μL）:ExTaq（5 U/μL）0.5μL，10×ExTaq buffer（Mg2+Plus）5μL，d NTP mixture（2.5 mmol/L）4μL，模板DNA（100 ng/μL）1μL，正、反向引物（10μmol/L）各1μL，ddH2O 37.5μL。PCR反应条件:94°C 5 min；94°C 30 s，55°C 30 s，72°C 2 min，35个循环；72°C 10 min；4°C保藏。