《表1 所需引物及其序列:食品中克罗诺杆菌属双重PCR检测试剂盒的评价》

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《食品中克罗诺杆菌属双重PCR检测试剂盒的评价》


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从NCBI(National Center for BiotechnologyInformation)数据库中搜索获取克罗诺杆菌属特异性靶基因16S rDNA[13]和ompA[14]序列文件,并经多重序列比对,选择其高度保守区序列并设计相应的PCR引物,具体序列见表1。利用单因素控制法,并根据相关报道以及前期预实验设计不同因素(包括MgCl2浓度、dNTPs浓度、Taq DNA Polymerase浓度、两对引物浓度配比、退火温度以及反应循环数)的梯度(如退火温度设置为42、43、44、45、46、47、48、49、50、51°C),以ATCC29544DNA为模板,逐个条件进行反应测试,最终获取最佳反应体系和条件。