《表1 菌株ATW1-2的5.8S rDNA+ITS序列(544bp)》

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《北京地区元宝枫枯萎病病原菌的分子鉴定》

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以菌株ATW1-2基因组总DNA为模板，利用真菌通用引物ITS1和ITS4进行PCR扩增，PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳，长度为500bp左右（图3）。PCR产物连接至T载体，然后进行热激转化大肠杆菌，挑取阳性克隆进行序列测定，其长度为544bp，基因序列已提交至GeneBank，登录号为MN013922，具体碱基序列见表1。在www.ncbi.nlm.nlh.gov数据库中进行BLAST比对。由比对结果可知，ATW1-2的5.8S rDNA+ITS序列与Genebank已登录16个Fusarium oxysporum的rDNA-ITS序列都具有100%一致性，从而确定ATW1-2与F.oxysporum是同一个种。利用MEGA7.0.26软件中的Neighbor-joining Tree作进化树分析，结果表明ATW1-2与尖孢镰刀菌（F.oxysporum）（EU839398.1和EU839370.1）具有较近的亲缘关系（图4）。