《表1 FXR、SHP定量检测用引物》

《表1 FXR、SHP定量检测用引物》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《电针预处理对心肌缺血再灌注大鼠的保护作用及FXR/SHP基因的调控作用》


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(3)荧光定量PCR法(qRTPCR法)检测FXR、SHP基因表达:取用EP管中心肌标本,按照Trizol法提取各样本的总RNA,取上述所得总RNA样品,按cDNA合成试剂盒说明书操作,合成各样本的cDNA,以β-actin为内参,上述反转录反应合成的cDNA为模板,采用SYBR Green I染料法,在Bio-Rad CFX96型荧光定量PCR仪上,按以下反应条件进行定量检测分析,95℃10 min,95℃30 s、55℃30 s、72℃10 s,40个循环。每个基因设3复孔,采用2-ΔΔCt法计算基因FXR、SHP相对于内参基因β-actin的表达量,各基因定量检测用引物如表1所示。在上述整个PCR完成后,进入熔解曲线程序:从65℃升温至95℃,每0.05 s升高0.5℃。