《表1 DUSP1、IGFBP1、FXR和ALDH8A1引物》

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6孔板细胞(每组重复3个复孔)提取细胞总RNA,用紫外分光光度法检测总RNA纯度和浓度,取1μg RNA按试剂盒说明进行反转录,取合成的cDNA进行实时荧光定量PCR,引物由Primer Premier5.0软件设计,引物序列、产物大小见表1。反应体系按试剂盒说明,GAPDH、DUSP1和IGFBP1反应条件为:预变性95℃15min;变性95℃10s,退火/延伸60℃20s,共40个循环(Roche Lightcycler96荧光定量PCR仪扩增);ALDH8A1和FXR反应条件为:预变性95℃15min;变性95℃10s,退火60℃20s,延伸72℃20s,共40个循环(Bio-rad IQ5荧光定量PCR仪扩增),结果分析采用2-△△Ct法分析。