《表1 可变剪接验证所用引物》

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《GmGBP1干涉转基因大豆种质创制及其对下游基因可变剪接的调控》

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TRIzol试剂盒法提取植物总RNA，反转录合成cDNA第一链。RT-PCR对GmGBP1干涉引起的转录组测序结果中的可变剪接进行验证。RT-PCR反应体系为:cDNA模板1μL，10×PCR buffer 2.5μL，d NTP（10 mmol/L）0.5μL，上游引物（10μmol/L）1μL，下游引物（10μmol/L）1μL，TaqDNA聚合酶0.3μL，用ddH2O补足至20μL。RT-PCR反应程序为:95℃预变性6min；95℃变性30s，退火温度如表1所示，复性30s，72℃延伸60s，进行40次循环；72℃延伸10min，4℃保存。